القياس الضوئي الكتلي لدراسة تفاعلات المستضد والأجسام المضادة على مستوى جزيء واحد

للكشف عن تفاعلات المستضد والأجسام المضادة باستخدام القياس الضوئي الكتلي ، أولا ، احتضان التركيز المطلوب من المستضدات والأجسام المضادة المنقاة للفترة الزمنية المطلوبة ، مما يسهل ارتباط المستضد والأجسام المضادة. استنادا إلى القياس المتكافئ لارتباط المستضد ، يمكن أن تحتوي مناطق الباراتوب لهذه الأجسام المضادة على أعداد متفاوتة من المستضدات المرفقة.

يتدفق في المحلول الذي يحتوي على الأجسام المضادة الحرة جنبا إلى جنب مع مجمعات الأجسام المضادة للمستضد من خلال غرفة تدفق مجمعة مسبقا. قم بتأمين الغرفة على مرحلة المجهر لمقياس ضوئي كتلي. بعد ذلك ، قم بتوجيه شعاع الليزر عبر غرفة التدفق للحصول على التصوير الأمثل.

اعتمادا على عدد المستضدات المرتبطة بكل جسم مضاد ، تتغير الكتلة الجزيئية للمجمعات. تتسبب هذه الاختلافات في الكتلة في تشتيت المجمعات للضوء بشكل مختلف.

المجمعات ذات الكتل الجزيئية الأعلى ، حيث يرتبط مستضدان بكلا الباراتوبات لجسم مضاد واحد ، تشتت المزيد من الضوء مقارنة بالمجمعات المحتوية على مستضد واحد. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر الأجسام المضادة الحرة أقل قدر من تشتت الضوء.

يجمع الكاشف الضوء المتناثر ويقيس تردده وكثافته. يسجل مقياس الضوء التقلبات في الضوء المتناثر كنمط تداخل ، ويمثل هذا على شكل بقع.

تتوافق البقع الباهتة مع الأجسام المضادة الحرة. في المقابل ، تمثل البقع الداكنة جدا مجمعات بها مس