قياس التدفق الخلوي الكمي لدراسة تفاعلات حويصلة البروتين والفوسفوليبيد المسمى

0 مشاهدات2:43 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
تعتبر

تفاعلات البروتين والفوسفوليبيد على غشاء الخلية ضرورية لتنظيم العديد من العمليات الخلوية.

للكشف عن التفاعلات المستهدفة بين البروتين والفوسفوليبيد في المختبر باستخدام قياس التدفق الخلوي الكمي ، خذ أنبوبا يحتوي على التركيز المطلوب من تقليد غشاء الخلية - حويصلات الفوسفوليبيد المحبة للدهون بحجم ميكرون ، والمسماة بالصبغة - في المخزن المؤقت.

أضف تركيزا مناسبا من البروتينات المستهدفة المختلفة ذات العلامات الفلورية في المحلول.

حقن التعليق في مقياس التدفق الخلوي. اضبط معلمات نظام السوائل على معدل تدفق منخفض للسماح بوقت كاف لتفاعلات البروتين والفوسفوليبيد.

عندما تتفاعل البروتينات ذات العلامات الفلورية والحويصلات الفوسفوليبيد في قناة التدفق ، يزداد تركيز البروتينات المرتبطة بالحويصلات.

عندما تمر هذه المجمعات عبر أشعة الليزر من قنوات مضان محددة توفر أطوال موجية مناسبة ، فإنها تصبح متحمسة. تصدر هذه البروتينات المثارة والحويصلات الفوسفورية في المركب إشارات مضان ذات صلة عند الاسترخاء إلى الحالة الأرضية ، والتي يتم التقاطها بواسطة أجهزة الكشف المناسبة.

يدل اكتشاف متوسط شدة مضان مرتفع للبروتينات على ارتباط البروتين بحويصلات الفوسفوليبيد.

ابدأ تجارب الربط الحركي عن طريق تخفيف حويصلات الفوسفوليبيد في عازلة Tyrode إلى تركيز 1 ميكرومولار وحجم إجمالي يبلغ 250 ميكرولترا. بعد ذلك ، قم بخلط عامل التخثر المسمى بالفلورسنت X أو fX-fd بتركيز 500 نانومولار مع حويصلات الفوسفوليبيد بنسبة 1: 1 للحصول على حجم إجمالي يبلغ 500 ميكرولتر.

قم

بحقن 500 ميكرولتر على الفور من التعليق المختلط في مقياس التدفق الخلوي بمعدل تدفق بطول موجي إثارة يبلغ 488 نانومتر ومرشح انبعاث 585 نانومتر بعرض 42 للقناة FL2.

بعد ذلك ، قم بقياس متوسط التألق في القناة FL4 مع الإثارة عند 633 نانومتر ومرشح الانبعاث عند 660 نانومتر بعرض 20. عندما يتحقق تشبع الربط ، قم بتخفيف العينة بسرعة 20 ضعفا باستخدام المخزن المؤقت Tyrode ، وراقب التفكك حتى يتم الوصول إلى مضان خط الأساس أو الهضبة.

11:22

استخدام ألوان جزيء واحد الحنق لدراسة الترابط بين تفاعلات البروتين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:10

خالية من المنظفات فائق السرعة إعادة تشكيل بروتينات الغشاء إلى بليرس الدهن باستخدام فوسوجينيك بروتيوليبوسوميس تكميلية مشحونة.

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:12

وصف مجموعات فرعية الوحيدات البشرية بالدم كله يتدفق التحليل الخلوي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:33

الكروماتوجراف الدهون تقارب الحويصلة بوساطة الفرز المغناطيسي باستخدام خلية المنشط (LIMACS) : طريقة جديدة لتحليل البروتين الدهني التفاعل

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:11

تدفق تحليل Cytometric من التكملة الإسفار ثنائي الجزيء: عالية الإنتاجية الأسلوب الكمي لدراسة التفاعل البروتين البروتين

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:39

تقنيات لتحليل خارج الخلية الحويصلات عن طريق التدفق الخلوي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:52

Radiolabeling والكمي لمستويات الخلايا من Phosphoinositides التي كتبها التلألؤ تدفق عالية الأداء اللوني السائل الديناميكي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:32

تقرير من سطح الخلية النسبي ومجموع التعبير عن قنوات المؤتلف ايون باستخدام التدفق الخلوي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:58

بيب على رقاقة: دراسة خالية من التسمية من التفاعلات البروتين فسفوانوسيتيد

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:38

والرمات التدفق الخلوي مع الخلية الفلورسنت المتوازية لخلية واحدة فقط مما يشير إلى تحليل واكتشاف العلامات البيولوجية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026