مقايسة تعديل الأس الهيدروجيني على الطبقات الدهنية الثنائية المدعومة للكشف عن تفاعلات البروتين والفوسفوينوزيتيد

فوسفاتيديلينوسيتول 4،5-ثنائي الفوسفات, أو PIP2, هو فوسفوليبيد فسفري المرتبط بالغشاء البسيط. يرتبط Phospholipase C ، أو PLC ، مع مجالات ربط PIP2 محددة ، ب PIP2 ، مما يولد رسل ثانويين ضروريين للعديد من العمليات الخلوية.

للكشف عن تفاعلات PLC-PIP2 في المختبر ، ابدأ بحويصلة صغيرة أحادية الصفيحة ، وسيارات الدفع الرباعي ، وتعليق حمضي ، يتألف من PIP2 وخليط فوسفوليبيد ، أحدهما مترافق مع صبغة فلورية حساسة للأس الهيدروجيني.

قم بعرض المحلول في مدخل جهاز ميكروفلويديك مجمع مسبقا وتوصيل أنبوب المخرج. انقل الجهاز وقم بتثبيته على مرحلة المجهر الفلوري. من خلال الجاذبية ، تمر سيارات الدفع الرباعي عبر أرضية القناة الدقيقة ، المصنوعة من غطاء زجاجي محب للماء.

تمتص سيارات الدفع الرباعي على السطح الزجاجي ، ويقلل الرقم الهيدروجيني للمحلول من التنافر الكهروستاتيكي بين الاثنين. تتفاعل سيارات الدفع الرباعي مع السطح ، وتشوه وتندمج لتشكيل حويصلات كبيرة.

بعد تغطية السطح الحرجة ، تتمزق الحويصلات تلقائيا ، وتشكل طبقة ثنائية دهنية مدعومة ، SLB. قم بتمرير مخزن مؤقت عبر القناة ، وإزالة الحويصلات غير الممتزة.

باستخدام قناة مضان مناسبة ، قم بتصوير القناة الدقيقة لتصور وقياس مضان الصبغة الحساسة للأس الهيدروجيني - عالية الفلورسنت عند درجة حموضة منخفضة - في SLB.

أدخل حل PLC مؤتلف في القناة الدقيقة. الرقم الهيدروجيني المحا