كالوريمتر المسح التفاضلي لدراسة تفاعل الترابط الحراري للحمض النووي
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 7:16 دقيقة • July 8th, 2025
يساعد كالوريمتر المسح التفاضلي في دراسة تفاعلات الجزيئات الحيوية والترابط عن طريق قياس الحرارة المطلوبة لتشويه طبيعة الجزيء الحيوي في غياب الترابط ووجوده.
للبدء ، خذ مرجعا يحتوي على أبتامير الحمض النووي الحر - قليل النوكليوتيدات أحادية الشريطة - وعينة تحتوي على أبتامير مرتبط بالترابط الحراري. تعمل الروابط على تثبيت الهيكل الثانوي للaptamer.
قم بإجراء مسح أمامي عن طريق تسخين المحاليل. عند الوصول إلى درجة حرارة الانصهار ، تتغير طبيعة الأبتامير الحرة.
تنفصل الأبتامرات المستقرة بالترابط عن الروابط وتتغير طبيعتها عند درجة حرارة أعلى نسبيا ، مما يتسبب في ارتفاع درجة حرارة الانصهار مقارنة بالأبتامير الحرة. في درجات الحرارة المرتفعة ، تحصل مجموعة فرعية من الروابط على شكل ثانوي لا رجعة فيه مع تقارب ربط منخفض.
بعد ذلك ، قم بإجراء فحص عكسي عن طريق تبريد المحاليل لاستعادة بنية أبتامر. عند درجة الحرارة المنخفضة ، ترتبط الروابط الأولية والمحولة في العينة بالأبتامر.
أثناء الفحص الأمامي الثاني ، تنفصل الأبتامرات المرتبطة بتقارب ضعيف مع الروابط المحولة وتتغير طبيعتها عند درجة حرارة أقل من الأبتامرات الأولية المرتبطة بالترابط ، مما يتسبب في انخفاض درجة حرارة الانصهار.
مع عمليات المسح المتتالية ، تستمر الروابط في التحول إلى الشكل الثانوي ، مما يؤدي إلى استنفاد كامل للشكل الأولي. احصل على الترموجرام.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية