موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 5:05 دقيقة • July 8th, 2025
الفحص المجهري للصفائح الضوئية الشبكية ، LLSM ، تصور تفاعلات مستقبلات سطح الخلية والترابط في الخلايا الحية ذات الدقة الزمانية المكانية العالية.
خذ غطاء يحتوي على خلايا معبرة عن الترابط المنقولة تنبعث منها مضان أحمر. قم بتوصيل خلية الغطاء بحيث يكون الجانب لأعلى على حامل عينة مدهون بالزبدة. قم بتثبيت الحامل على بيزو مرحلة المجهر للسماح بوضع العينة بدقة والمسح الضوئي أثناء التصوير. اضبط إعدادات البرنامج للتركيز على خلية واحدة تعبر عن الترابط.
ماصة تعليق الخلية الشفطرة عن المستقبلات على الغطاء. يتم تمييز المستقبلات بأجسام مضادة تحمل علامة الفلوروفور الأخضر. تصور أزواج الخلايا المتفاعلة.
ينبعث ليزر الإثارة في المجهر شعاع ليزر دائري مستقطب خطيا يمر عبر عدسات أسطوانية لإنشاء ورقة ضوئية. يتم إسقاط ورقة الضوء على معدل يزيل الحيود الزائد ويحوله إلى نمط شبكي رفيع للغاية.
تضيء الورقة الضوئية الشبكية قسما رفيعا للغاية من زوج الخلايا المتفاعلة ، ويتم التقاط التألق المنبعث من الخلايا المتفاعلة بشكل عمودي على الحزمة الساقطة. قم بتصوير زوج الخلايا المتفاعلة في طائرات Z متعددة ، والتقط صورا ثنائية الأبعاد في كل مستوى بؤري باستخدام كاميرا عالية السرعة.
باستخدام برنامج مناسب ، اجمع بين هذه الصور لتشكيل مكدس z - صورة عالية الدقة رباعية الأبعاد توضح الديناميكيات الزمانية المكانية للتفاعل بين مستقبلا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية