الفحص المجهري للحقل المظلم لتصور ديناميكيات انتشار القضبان النانوية على غشاء الخلية

0 views • 5:15 min • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

للتحقيق في ديناميكيات انتشار القضبان النانوية الذهبية على غشاء الخلية الحية باستخدام الفحص المجهري للحقل المظلم ، يبدأ DFM ، جنبا إلى جنب مع تتبع الجسيم الفردي ، بغطاء معقم في طبق استزراع يحتوي على وسط مناسب. أضف تعليق الخلية إلى قسيمة الغطاء. يسهل الوسيط نمو الخلايا.

احتضن بقضبان نانوية ذهبية موجبة الشحنة تمتص على غشاء الخلية سالب الشحنة عبر التفاعلات الكهروستاتيكية. ماصة الوسط من الطبق إلى أخدود شريحة زجاجية. ضع خلية الغطاء على الأخدود ، وأغلقها.

ضع الشريحة على مرحلة مجهر المجال المظلم. يضيء المجهر العينة بضوء مائل عالي الزاوية يمر عبر مكثف مظلم متخصص.

عند إضاءة القضبان النانوية ، تتأرجح الإلكترونات الحرة الموجودة على سطح القضبان النانوية عند تردد يتردد مع الضوء الساقط. تشتت الإلكترونات المتذبذبة الضوء بطول موجي محدد تم التقاطه بواسطة العدسة الموضوعية ، مما يتيح تصور القضبان النانوية.

وبالمثل ، فإن غشاء الخلية - المكون من الدهون والبروتينات - ينثر الضوء الساقط عند معامل انكسار أعلى من الوسط المحيط ، مما يخلق صورة ساطعة على خلفية داكنة. التقاط صور السلسلة الزمنية في سوق دبي المالي.

باستخدام برنامج مناسب ، قم بإجراء تحليل تتبع الجسيم الفردي على صور DFM لتصور انتشار القضبان النانوية عبر غشاء الخلية بدقة زمانية مكانية عالية.

ابدأ بحرق غطاء زجاجي مغموس بالإيثانول على اللهب ، ووضع الغطاء في طبق ثقافة خلية مقاس 35 × 10 ملم يحتوي على 2 مل من وسط زراعة الخلايا بدون أحمر الفينول. أضف 50 ميكرولترا من تعليق الخلية محل الاهتمام على الغطاء ، وقم بهز الطبق برفق ذهابا وإيابا ويسارا ويمينا لتوزيع الخلايا بالتساوي.

ضع الطبق في حاضنة زراعة الخلايا لمدة 12 ساعة تقريبا حتى تصل الخلايا إلى 20٪ إلى 40٪ قبل إضافة 20 ميكرولترا من قضبان الذهب النانوية المطلية ب CTAB إلى الطبق. بعد الرج اللطيف لتفريق القضبان النانوية بالتساوي عبر الطبق ، ضع الطبق في جو رطب لمدة 5 دقائق.

في نهاية الحضانة ، انقل ببطء 100 ميكرولتر من المادة الطافية من الطبق إلى أخدود شريحة زجاجية ، ثم ضع خلية الغطاء بعناية على أخدود الشريحة. بعد ذلك ، أغلق حافة الغطاء بطلاء الأظافر واترك طلاء الأظافر يجف قبل وضع الشريحة على مرحلة مجهر المجال المظلم.

لتتبع الجسيم الفردي عن طريق الفحص المجهري للمجال المظلم ، ضع قطرة من الزيت على مكثف الحقل المظلم المغمور بالزيت وأدر المقبض حتى يلامس المكثف الشريحة الزجاجية. ضع قطرة من الزيت على الجزء العلوي من زجاج الغطاء وأدر مقبض التركيز البؤري حتى يلامس هدف الغمر بالزيت بمعدل 60 ضعفا الزيت.

قم بتشغيل مصدر الضوء ، وقم بتدوير مقبض التركيز البؤري قليلا لتركيز مستوى التصوير. بعد ذلك ، انقر فوق رمز الكاميرا في برنامج المجهر لتسجيل عينة من السلاسل الزمنية لصورة ضوء التشتت باستخدام كاميرا CMOS الملونة وحفظ الصورة بتنسيق TIFF.

لاستخراج مسار واحد طويل المدى، افتح الصورة في ImageJ وانقر فوق صورة | اكتب | و8 بت لتحويل الصورة من وضع RGB إلى وضع 8 بت. لضبط التباين، انقر فوق صورة | ضبط | سطوع | تباين، وقم بتعيين المعلمات. حدد جسيما مستهدفا واستخدم "Control + X" لقطع خلفية السلسلة الزمنية.

انقر فوق المكونات الإضافية | تعقب الجسيمات الكلاسيكي | وتتبع الجسيمات لفتح نافذة اكتشاف الجسيمات وربط الجسيمات وتعيين نصف القطر على 6 ، والقطع على 0 ، والنسبة المئوية إلى 0.01٪. اضبط نطاق الارتباط على 10 والإزاحة على 10 ، وانقر فوق "موافق" لفتح نافذة نتائج تعقب الجسيمات لرؤية النتائج.

انقر فوق "تصور جميع المسارات" لفحص المسارات التي تم إنشاؤها. إذا كان المسار الذي تم إنشاؤه بواسطة البرنامج والمسار المتحرك للقضبان النانوية الذهبية متطابقين ، فانقر فوق "حفظ التقرير الكامل" لحفظ النتائج. إذا كان المسار الذي تم إنشاؤه بواسطة البرنامج لا يتطابق مع المسار المتحرك للقضبان النانوية الذهبية ، فانقر فوق "إعادة ربط الجسيمات" لإعادة ربط الجسيمات المكتشفة بنطاق ارتباط مختلف ومعلمات النسبة المئوية.

07:30

تعزيز السريع نانوبروبي إشارة بتوليف نانوحبيبات الذهب في الموقع

Related Videos

0 Views

08:13

دليل لبناء يميل درجة عالية اجتاحت بلاط المجهر لتصوير جزيء مفرد الحقل لعرض موسع

Related Videos

0 Views

07:33

الأغشية الدهنية ثنائية الطبقات المربوطة لمراقبة نقل الحرارة بين الجسيمات النانوية الذهبية والأغشية الدهنية

Related Videos

0 Views

10:26

تعيش خلية من خلايا التصوير تعرب عن ترحيل البروتينات Fluorescently الموسومة في مصفوفة ثلاثية الأبعاد

Related Videos

0 Views

14:09

توطين والكمي النسبية من أنابيب الكربون النانوية في الخلايا مع متعددة الأطياف التصوير التدفق الخلوي

Related Videos

0 Views

15:10

من السريع إلى التصوير الإسفار الجزيئية قانون إنتشار على أغشية الخلايا الحية في المجهر التجاري

Related Videos

0 Views

09:31

الذهب Nanorod بمساعدة تحفيز البصري من الخلايا العصبية

Related Videos

0 Views

12:15

معالجة البروتوكول لتحليل نشر وحجم الكتلة من مستقبلات الغشاء بالفحص المجهري Fluorescence الصور

Related Videos

0 Views

09:09

تصور ديناميات الانتشار من نانورود الذهب على غشاء الخلية باستخدام جسيمات نانوية واحدة Darkfield المجهرية

Related Videos

0 Views

05:56

التحليل الطيفي للارتباط الفلوري للتباين الموضعي لتحليل الانتشار الجزيئي في الغشاء البلازمي للخلايا الحية

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026