الفحص المجهري لانعكاس التداخل للتصور الخالي من الملصقات لديناميكيات الأنابيب الدقيقة
موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 6:36 دقيقة • July 8th, 2025
يتيح الفحص المجهري لانعكاس التداخل تصوير الأنابيب الدقيقة التي تنمو وتتقلص ديناميكيا.
ثبت شرائح البارافين على غطاء واحد وضع غطاء أصغر قليلا في الأعلى. يسخن لإذابة البارافين ، وتشكيل قناة مغلقة. الماصة محلول يحتوي على أجسام مضادة عبر القناة. تلتصق الأجسام المضادة بسطح الغطاء. أضف محلولا مانعا ، مما يمنع المناطق غير المرتبطة بالأجسام المضادة ويمنع ارتباط البروتين غير المحدد.
ضع الغطاء على مرحلة المجهر. اضبط سخان العينة على درجة حرارة تسهل نمو الأنابيب الدقيقة.
استقرت بذور الأنابيب الدقيقة للماصة باستخدام غوانوزين ثلاثي الفوسفات غير القابل للتحلل المائي ، GTP ، التناظرية. ترتبط البذور بالغطاء المطلي بالأجسام المضادة. أضف مخزن مؤقت يحتوي على توبولين غير مسمى و GTP وعوامل الاختزال.
في درجة الحرارة المثلى والظروف العازلة ، تعمل البذور كمواقع تنوي ، مما يسمح بربط الأنابيب غير المسمى ونمو الأنابيب الدقيقة.
ابدأ التصوير. يركز الضوء الساقط من خلال غشاء فتحة على مقسم شعاع يعكس الضوء جزئيا إلى الهدف ، ويضيء العينة. تعكس واجهة الغطاء الزجاجي المخزن المؤقت جزئيا الضوء الساقط. يمر الضوء الساقط المتبقي وينعكس في واجهات الأنابيب الدقيقة العازلة.
بناء على مسافة غطاء الأنابيب الدقيقة ، تتداخل الحزم المنعكسة من الواجهتين ، مما ينتج عنه تداخل بناء - تتحد الحزم لإنتاج إشارة ساطعة ، أو تداخل مدمر - تلغي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية