الفحص المجهري للقوة الذرية الساكنة لتصور وتوصيف النيوكليوسومات المجمعة

تتكون النيوكليوسومات ، الوحدة المتكررة الأساسية للكروماتين حقيقيات النواة ، من لفات الحمض النووي ملفوفة حول نواة من بروتينات الهيستون.

لتصور النيوكليوسومات المجمعة عن طريق الفحص المجهري للقوة الذرية الساكنة ، AFM ، ابدأ بشريط ميكا رفيع ، يعمل لجعل السطح موجبة الشحنة. قطع الشريط إلى مربعات صغيرة. ماصة تعليق النيوكليوسوم المجمع.

يرتبط الحمض النووي سالب الشحنة في النيوكليوسوم بالمجموعة الموجبة الشحنة لشريط الميكا الوظيفي من خلال التفاعلات الكهروستاتيكية. يغسل بمحلول عازل لمنع اكتظاظ النيوكليوزوم.

قم بتثبيت شريط الميكا على قرص دعم العينة. قم بتثبيته على مرحلة أداة AFM.

قم بتوصيل حامل المسبار بالرأس البصري للأداة. يحتوي الحامل على ناتئ AFM مثبت مسبقا مع طرف في قمته.

قم بمحاذاة شعاع الليزر على ظهر الكابولي لقياس الانحراف بدقة. ضع الطرف على اتصال مباشر بالسطح المحتوي على النيوكليوزوم.

أثناء تصوير وضع التلامس ، عندما يمسح طرف الكابولي سطح النيوكليوسوم ، تنشأ قوى التنافر بعد التفاعلات بين ذرات الطرف والعينة. هذا يتسبب في ثني الكابولي. ينعكس شعاع الليزر بشكل مختلف ويتم توجيهه إلى كاشف الضوء الحساس للموضع.

تحافظ حلقة التغذية الراجعة على انحراف ناتئ ثابت عن طريق حركة الماسح الضوئي الرأسية أثناء الفحص. تستخدم إشارة التغذية الراجعة هذه أيضا لتوليد صور النيوكليوسوم الطبوغرافي. يظهر قلب النيوكليوس