موسوعة JoVE للتجارب
التقنيات البيولوجية
0 مشاهدة • 4:56 دقيقة • July 8th, 2025
تتكون النيوكليوسومات - وحدات تكرار الحمض النووي حقيقية النواة - من أجزاء من الحمض النووي ملفوفة حول نوى بروتين هيستون. يعد فك الحمض النووي حول قلب هيستون أمرا بالغ الأهمية لديناميكيات النيوكليوسوم.
لالتقاط ديناميكيات النيوكليوسوم ، ابدأ بركيزة الميكا السلسة والوظيفية المثبتة على مجهر القوة الذرية ، AFM ، مرحلة الماسح الضوئي. تراكب الركيزة بمخزن مؤقت يحتوي على النيوكليوزوم.
يتفاعل الحمض النووي النيوكليوسوم سالب الشحنة مع الشحنات الموجبة على الميكا الوظيفية ، مما يؤدي إلى جمالها على السطح. اغسل ركيزة الميكا المجمدة بمحلول عازل لمنع اكتظاظ النيوكليوسومات.
انقل مرحلة الماسح الضوئي المحتوي على النيوكليوسوم إلى غرفة تصوير تحتوي على ناتئ مركب مسبقا ، مع طرف على الحافة ويواجه لأعلى نحو النيوكليوسومات.
املأ الغرفة بمخزن مؤقت للتصوير. قم بمحاذاة شعاع الليزر على الجزء الخلفي من الكابول لضمان قياسات الانحراف الدقيقة.
يتأرجح طرف AFM بالقرب من النيوكليوسومات الملفوفة بالكامل ويقوم بالمسح فوق السطح لقياس ارتفاع النيوكليوسومات على فترات منتظمة.
يزيدفك الحمض النووي التلقائي من ارتفاع النيوكليوسوم ، مما يؤدي بالتناوب بين تذبذبات الطرف ويؤدي إلى انحراف ناتئ. يؤدي هذا الانحراف الكابولي إلى تغيير موضع شعاع الليزر المنعكس ، والذي يتم اكتشافه بواسطة كاشف حساس للموضع وينتج صورا للنوكليوسوم الطبوغرافية.
ف
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية