تقنية التحليل الطيفي لثنائي اللون الدائري لدراسة تفاعلات الحمض النووي والبروتين

تنظم بروتينات إعادة تشكيل الكروماتين المعتمدة على ATP التعبير الجيني في الكروماتين المعبأ بإحكام عن طريق تغيير تشكل الحمض النووي بطريقة تعتمد على ATP.

لدراسة تفاعلات الحمض النووي لإعادة تشكيل الكروماتين باستخدام ثنائي اللون الدائري ، أو التحليل الطيفي الدائري ، خذ محلولا من قليل النوكليوتيدات مزدوجة الشريطة. تسخين لتشويه طبيعة قليل النوكليوتيدات ، وضعها على الجليد.

يتسبب التبريد السريع في إعادة تشكيل الحمض النووي أثناء تكوين الهياكل الثانوية. توفر منطقة الانتقال المزدوجة إلى الخيط الفردي موقع ربط مثاليا لأجهزة إعادة تشكيل الكروماتين.

أضف الحمض النووي المبرد بالحرارة إلى كوفيت. أضف المخزن المؤقت الذي يحتوي على إعادة تشكيل الكروماتين المعتمد على ATP و ATP وأيونات المغنيسيوم.

يرتبط جهاز إعادة التشكيل بالحمض النووي ، متبوعا بارتباط ATP المركب بأيون المغنيسيوم بالبروتين - مما يؤدي إلى تنشيطه. يقوم جهاز إعادة التشكيل المنشط بتحلل ATP - مما يؤدي إلى تكوين حلقة جذعية في الحمض النووي.

مرر الضوء المستقطب دائريا إلى اليسار واليمين - باختلاف طور 90 درجة - عبر العينة. يمتص الحمض النووي اللولبي بصريا الضوء المستقطب الدائري الأيسر والأيمن بدرجات مختلفة.

ينتج عن الامتصاص التفاضلي ، الذي يطلق عليه ثنائي اللون الدائري ، استقطاب الضوء المرسل بشكل بيضاوي الشكل ، والذي يقاس على أنه إهليلجي. تؤكد قمتان