التوليد في المختبر للخلايا المتغصنة البلازمية من الأسلاف اللمفاوية الشائعة

الخلايا المتغصنة البلازماسيتيويدية ، أو pDCs ، هي خلايا مناعية تستجيب للعدوى عن طريق إنتاج إنترفيرون السيتوكين من النوع الأول.

لتوليد pDCs في المختبر ، خذ تعليقا من الخلايا السلفية اللمفاوية الشائعة ، أو CLPs ، المعزولة من نخاع عظم الفأر. يمكن أن تتمايز CLPs إلى خلايا ليمفاوية وخلايا غصنية.

أضف معلق الخلية فوق طبقة من الخلايا المغذية — الخلايا اللحمية الملتصقة — المشعة بأشعة جاما لمنع التكاثر. توفر الخلايا المغذية السيتوكينات والتلامس الخلوي المطلوب لتمايز CLPs.

أضف تركيزا مناسبا من التيروزين كيناز 3 ليجند الشبيه ب FMS ، أو FL - سيتوكين ثنائي التكافؤ يعزز تطور pDC - واحتضانه.

تهاجر CLPs بين الخلايا المغذية وتتكاثر لتشكيل مجموعات من الخلايا ، تسمى المناطق المرصوفة بالحصى.

يرتبط FL الموجود في الوسط بمستقبل Flt3 - مستقبل التيروزين كيناز - على CLPs. يؤدي الارتباط إلى إزدخار المستقبلات والفسفرة الذاتية لبقايا التيروزين في المجال السيتوبلازمي.

ترتبط بروتينات المحول السيتوبلازمي بهذه المخلفات وتصبح فسفرة ، مما يؤدي إلى نقل الإشارة إلى مكونات الإشارات النهائية. يتسبب تسلسل الإشارات في تمايز CLPs إلى pDCs - خلايا مستديرة صغيرة تنمو في معلق - بالإضافة إلى الخلايا المتغصنة التقليدية ، أو cDCs - خلايا ملتصقة أكبر على شكل مغزل.

اجمع الخلايا. أضف أجساما مضادة ضد علامات السطح الخاصة ب pDC- و cDC.