تحديد مثبطات الكيناز التي تعدل استجابة الخلايا الزعترية لإشارات TCR القوية
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 6:42 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بخلايا الخلايا الزعترية للفئران في طبق متعدد الآبار. أضف حبات مغناطيسية مطلية بالأجسام المضادة ل CD3 و CD28. إلى مجموعة فرعية من الآبار ، أضف تركيزا مناسبا لمثبط كيناز الاختبار. حضن.
ترتبط الأجسام المضادة بمستقبلات CD3 و CD28 على سطح الخلية على الخلايا الغدة الصعترية الإيجابية المزدوجة وتنشطها ، مما يتسبب في تقليل تنظيم مستقبلات الخلايا التائية ، و TCRs ، وتنشيط كيناز بروتين العصارة الخلوية.
تعملكينازات البروتين هذه على تنشيط مسارات الإشارات النهائية ، مما يؤدي إلى زيادة تعبير CD69 على سطح الخلية وتنشيط العصارة الخلوية caspase-3. يشق الكاسباز 3 المنشط البروتينات الخلوية الأساسية — مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج للخلايا الزعترية.
في الخلايا المعالجة بمثبط الكيناز ، تمنع المثبطات كينازات العصارة الخلوية ، مما يعدل تعبير CD69 وتنشيط كاسباز 3.
الماصة في كوكتيل الأجسام المضادة الموسومة بالفلوروفور الذي يرتبط بمستقبلات TCR و CD4 و CD8 المشتركة للخلايا الصعترية ومستقبلات CD69. عالج الخلايا الزعترية بمخزن مؤقت لإصلاحها ونفاذها.
احتضان بجسم مضاد مضاد للكاسباز -3 الموسوم بالفلوروفور يرتبط بالعصارة الخلوية caspase-3. تحليل الخلايا الزعترية باستخدام قياس التدفق الخلوي.
تعبر الخلايا الصعترية الإيجابية المزدوجة عن علامات سطح الخلية الفلورية CD4 و CD8 و CD69 والكاسباز داخل الخلايا -3 وتظه
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية