موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:27 دقيقة • July 8th, 2025
تكوين العظم هو العملية التي تتمايز من خلالها سلائف ناقضات العظم وتندمج لتشكيل ناقضات العظم متعددة النوى.
لدراسة تأثير الجسم المضاد ل c-fms على تكوين العظم في المختبر ، خذ صفيحة مزرعة تحتوي على تعليق خلية نخاع عظم الفأر. أضف عامل تحفيز مستعمرة البلاعم ، M-CSF.
في الثقافة ، يرتبط M-CSF بمستقبله المحدد ، c-fms ، على خلايا السلائف النخاعية ، مما ينشط مسارات الإشارات ويسبب التمايز إلى ضامة نخاع العظام ، BMMs ، التي تمثل سلائف ناقضات العظم وتلتصق باللوحة.
قم بإزالة الخلايا غير الملتصقة. احصد BMMs وبذرها في آبار متعددة الآبار. مكمل مع M-CSF ومنشط مستقبلات العامل النووي kappa-Β ligand ، RANKL.
أضف تركيزات متزايدة من الأجسام المضادة ل c-fms إلى الآبار.
في بئر التحكم ، يرتبط M-CSF بمستقبلات c-fms وينشط مسارات الإشارات ، مما يحفز تعبير مستقبلات RANK ويعزز بقاء BMM وانتشاره. يرتبط RANKL بمستقبلات RANK ، مما يؤدي إلى سلسلة إشارات ويسبب تمايز BMM والاندماج في ناقضات العظم.
في الآبار ذات تركيزات الأجسام المضادة الأعلى ، ترتبط الأجسام المضادة وتمنع مستقبلات c-fms بشكل فعال وتعطل الإشارات المطلوبة لتمايز ناقضات العظم ، وبالتالي تثبيط تكوين ناقضات العظم.
قم بإجراء تلطيخ لتحديد وتحديد مجموعات ناقضات العظم وتحديد تركيز الأجسام المضادة الفعالة لتثبيط تكوين العظم في تكوين ناقضات العظم الناجم عن RANKL.
ق
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية