موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:50 دقيقة • July 8th, 2025
كبريتات ديكستران الصوديوم إلى التهاب القولون — وهو مرض التهابي في الأمعاء — حيث يؤدي اضطراب الحاجز الظهاري المعوي إلى الالتهاب.
لتقييم تلف الأنسجة، خذ أنسجة القولون الثابتة المعزولة من نموذج الفئران لالتهاب القولون الناجم عن DSS. اغمر الأنسجة في وسط التضمين لسهولة التقسيم ، وقم بتجميدها بسرعة.
باستخدام ميكروتوم التبريد ، احصل على قسم رقيق من الأنسجة واجمعه على شريحة زجاجية.
اغمس الشريحة في محلول يحتوي على صبغة الهيماتوكسيلين المؤكسدة المرتبطة بالكاتيون المعدني - مما يضفي شحنة موجبة على الصبغة. يرتبط مركب الصبغة بالحمض النووي سالب الشحنة ، مما يؤدي إلى تلطيخ النواة الأرجوانية المحمرة.
اغمر الأنسجة في محلول حمضي كحول متمايز ، وإزالة الصبغة غير المرتبطة على وجه التحديد من السيتوبلازم والمصفوفة خارج الخلية. اشطف الأنسجة بعامل أزرق - وسط قلوي - لإضفاء اللون الأزرق على النوى ، مما يعزز التباين.
اغمر الشريحة في زيادة تركيزات الكحول لتجفيف الأنسجة مما يعزز اختراق البقعة المضادة.
اغمس الأنسجة في البقعة المضادة - محلول اليوزين الحمضي - لإضفاء اللون الوردي على البروتينات السيتوبلازمية الأساسية والمصفوفة خارج الخلية. اغسل الشريحة بالكحول لإزالة اليوزين الزائد. اغمس الأنسجة في الزيلين لجعل الأنسجة شفافة — لفحص مجهري أفضل.
تحت المجهر ، يظهر قسم القولون تلف الأنسجة المتفاقم ، مما يشير إلى ال
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية