تقييم التهاب القولون الناجم عن المواد الكيميائية عن طريق التحليل الكيميائي المناعي لأقسام أنسجة القولون

في الفئران ، تتكون الطبقة المخاطية للقولون من خلايا مناعية تحتوي على الصفيحة المخصوصة ، وتحيط بها ظهارة معبأة بإحكام تحمي الغشاء المخاطي. تؤدي المعالجة الكيميائية بكبريتات الصوديوم ديكستران إلى تعطيل الوصلات الضيقة ، مما يتسبب في تلف الخلايا الظهارية وتمكين الميكروبات اللمعية من اختراق الصفيحة الخاصة.

يؤدي

التعرف الميكروبي في القولون على إفراز الكيموكينات ، مما يؤدي إلى تسلل الخلايا المناعية وإطلاق السيتوكينات المؤيدة للالتهابات. تؤدي هذه الاستجابة المناعية المبالغ فيها إلى التهاب القولون أو التهاب القولون.

لتقييم التهاب القولون الناجم عن المواد الكيميائية ، ابدأ بشريحة زجاجية تحمل قسما ثابتا من أنسجة القولون في الفأر معالجا مسبقا يظهر التهاب القولون الناجم عن المواد الكيميائية. عالج القسم بمزيج من الأجسام المضادة الأولية الخاصة بمستقبلات الخلايا المناعية التي ترتبط بالخلايا المناعية الخاصة بها.

يغسل لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة. احتضان قسم الأنسجة بالأجسام المضادة الثانوية البيوتينيل ، والتي ترتبط على وجه التحديد بالأجسام المضادة الأولية. احتضان مع اقتران إنزيم الستربتافيدين ، الذي يتفاعل مع البيوتينات ، ويشكل مجمعات.

تراكب قسم الأنسجة بركيزة كروموجينيك؛ يضفي التفاعل بين الإنزيم والركيزة لونا بنيا على الخلايا المناعية. قم بصبغة القسم بصبغة الهيماتوكسيلين لتلطيخ نوى الخلية.