قتل خلايا K562 بواسطة خلايا الدم المحيطية أحادية النواة المعرضة لمستحضرات منتجات التبغ
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:41 دقيقة • July 8th, 2025
تنشط الخلايا السرطانية الخلايا المناعية المستجيبة لإطلاق السيتوكينات والحبيبات المحللة للخلايا التي تحتوي على البرفورين والجرانزيم. يشكل البرفورين مساما في غشاء الخلية السرطانية ، مما يسهل دخول الجرانزيم إلى الخلية ويبدأ موت الخلايا المبرمج ، مما يتسبب في موت الخلايا.
لتحليل الوظيفة المحللة للخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي البشري ، PBMCs ، بعد إعداد منتج التبغ ، TPP ، التعرض ، خذ صفيحة متعددة الآبار مع زيادة تركيزات TPP. يعمل البئر المحتوي على الوسط كعنصر تحكم.
أضف تعليق PBMC. عامل المثبط للمناعة الأساسي TPPs ، النيكوتين ، يرتبط بمستقبلات أستيل كولين النيكوتين المستجيب PBMCs ، مما يقلل من تنظيم إنتاج السيتوكين المؤيد للالتهابات.
الطرد المركزي. إزالة طافي المحتوية على برنامج النقاط التجارية. إعادة تعليق PBMCs في الوسائط. أضف خلايا K562 المصنفة بالفلورسنت ، وخلايا سرطان الدم البشرية التي لديها قابلية متزايدة للسمية الخلوية للخلايا المستجيب PBMC ، إلى الآبار.
تظهر الخلايا المستجيبة المعالجة ب TPP ذات الاستجابات المناعية المكبوتة تعبيرا منخفضا عن بيرفورين وإفراز السيتوكين ، مما يقلل من قدرة PBMC على التحلل الخلوي.
الطرد المركزي. أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت متبوعا بصبغة فلورية غير منفذة للخلية. تدخل الصبغة إلى الخلايا ذات الأغشية المعرضة للخطر وتلطخ الحمض النووي.
باستخدام مقياس
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية