القياس الكمي للعدوى البكتيرية في الخلايا المضيفة عن طريق فحص وحدة تكوين المستعمرة

لبدء وحدة تشكيل المستعمرة ، أو CFU ، الفحص لتحديد البكتيريا القابلة للحياة ، خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على البلاعم المستزرعة في وسط النمو. تصيب البلاعم بالليستيريا المستعدة ، وهي بكتيريا مسببة للأمراض قادرة على النمو داخل الخلايا.

أثناء الإصابة ، تبتلع البلاعم البكتيريا ، وتستوعب البكتيريا داخل حجرة مرتبطة بالغشاء - البلعمة.

تفرز البكتيريا سما مكنا للمسام وتعطل الغشاء البلعمي. وبالتالي ، يسمح للبكتيريا بدخول العصارة الخلوية والتكاثر داخل الضامة.

عالج الضامة المصابة لفترة وجيزة باستخدام الجنتاميسين ، وهو مضاد حيوي يقضي بشكل انتقائي على البكتيريا غير الداخلية مع الحفاظ على البكتيريا داخل الخلايا.

استنشاق الوسائط العلوية التي تحتوي على مضادات حيوية. بعد ذلك ، أضف الماء المقطر المعقم فوق البلاعم المصابة ، مما يخلق بيئة منخفضة التوتر. هذا يؤدي إلى التناضح ، حيث تدخل جزيئات الماء إلى الخلايا وتسبب تحلل البلاعم ، وتطلق المكونات داخل الخلايا ، بما في ذلك البكتيريا.

انشر محللة الخلية التي تحتوي على بكتيريا داخل الخلايا على صفيحة أجار lysogeny ، مما يعزز فصل الخلايا البكتيرية الفردية ويتيح نموها المستقل. أثناء الحضانة ، تنمو البكتيريا القابلة للحياة على سطح الأجار وتشكل مستعمرات متميزة.

عد المستعمرات على اللوحة واحصل على CFU ، الذي يمثل البكتيريا داخل الخلايا التي تهربت من الاستجابة المنا