موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:40 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بذبابة الفاكهة السوداء البالغة التي يتم حقنها بالإشريكية القولونية. في النقاط الزمنية المرغوبة بعد الحقن ، قم بنقل الذباب المخدر إلى أنابيب منفصلة للطرد المركزي الدقيق على الجليد ، مما يقلل من نشاطها الأيضي.
أضف عازلة وتجانس الذباب ، وتحطيم الأنسجة ، وإطلاق الإشريكية القولونية وميكروبات الأمعاء الداخلية.
نقل كل بكتريا قولونية متجانسة ذبابة إلى آبار صفائح متعددة الآبار. املأ الآبار المتبقية بالمخزن المؤقت. إجراء التخفيف التسلسلي للبكتريا القولونية المتجانسة المحتوية على القولونية.
قم بإيداع المعلق المتجانس المخفف من كل بئر بالإضافة إلى البقع المنفصلة على صفيحة أجار المغذيات ، بدءا من أدنى تخفيف. اسمح للبقع بالامتصاص في أجار. احتضان اللوحة طوال الليل لتمكين بكتريا قولونية التكاثر ، وتشكيل مستعمرات مرئية. مدة الحضانة ضرورية لمنع تكوين مستعمرات الجراثيم الأمعاء الداخلية للذبابة.
عد مستعمرات الإشريكية القولونية لكل ذبابة من التخفيفات ذات المستعمرات غير المتداخلة القابلة للعد. احسب وحدة تكوين المستعمرة - الحمل البكتيري القابل للحياة - في بداية التجانس في نقاط زمنية مختلفة بعد الحقن.
يشير انخفاض حمل الإشريكية القولونية بمرور الوقت إلى إزالة البكتيريا من قبل الجهاز المناعي للذبابة.
ضع مجموعة فرعية من الذباب المصاب في أنابيب طرد مركزي دقيقة فردية على الجليد. أضف 250 ميكرولترا من PBS إل
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية