موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:23 دقيقة • July 8th, 2025
فيروس ذبابة الفاكهة C ، أو DCV ، وهو فيروس RNA إيجابي أحادي الشريطة ، يصيب ذبابة الفاكهة السوداء.
أثناء الإصابة ، يستخدم DCV آلية الخلايا المضيفة لتكرار الجينوم الفيروسي ، مما ينتج عنه جزيئات الفيروس في النهاية. تظهر الخلايا المصابة تأثيرات اعتلال خلوي ، CPE ، وتخضع للتحلل أو تموت بدون تحلل بسبب عدم قدرتها على الانقسام.
لتحديد متوسط الجرعة المعدية لزراعة أنسجة الفيروس ، يبدأ تركيز DCV الذي تظهر عنده نصف الخلايا المصابة CPE بتعليق DCV المخفف بشكل متسلسل.
نقل إلى صفيحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا ذبابة الفاكهة S2 * شبه الملتصقة المشتقة من أجنة المرحلة المتأخرة من ذبابة الفاكهة السوداء ، مضيف DCV طبيعي. تعمل الآبار التي تحتوي على وسط وخلايا كعناصر تحكم سلبية.
احتضان الفيروس ليصيب الخلايا. تظهر الخلايا المصابة بالفيروس CPE عن طريق تلف الخلايا وموتها. بعد الحضانة ، راقب الآبار تحت المجهر.
تحديد الآبار الإيجابية والسالبة CPE عبر التخفيفات. استخدم طريقة مناسبة لتحديد متوسط الجرعة المعدية لزراعة أنسجة الفيروس من DCV.
لتحديد متوسط الجرعة المعدية لزراعة الأنسجة الفيروسية ، أولا ، قم أولا بزرع 1 × 105 S2 خلايا نجمية في 100 ميكرولتر من الوسط الكامل في ثمانية آبار لكل عمود في 12 صفا من صفيحة 96 بئرا. ثم أعد اللوحة إلى حاضنة 25 درجة مئوية.
حدد بشكل عشوائي خمسة أنابيب من الفيروس من تخزين 80 درج
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية