تقنية لتقييم الاستجابة المناعية ضد المستضد عن طريق إحداث التهاب الجلد

خذ فأرا مخدرا بآذان منزوعة الشعر، وقم بتطبيق مستضد الاختبار — وهو هابتين ممزوج بمحلول مناسب للمركبة — على الجلد المكشوف. يسهل محلول السيارة اختراق hapten عبر طبقة البشرة الخارجية للوصول إلى الأدمة الأساسية.

يرتبط هابتن ببروتينات الجلد ، ويشكل جنينا مناعيا معترفا به بواسطة الخلايا العارضة للمستضد أو APCs. عند الابتلاع ، تقوم APCs بمعالجة وعرض الجين المناعي على سطحها.

تهاجر APCs إلى الغدد الليمفاوية ، وتقدم المناعة للخلايا التائية الساذجة وتنشيطها. تتمايز الخلايا المنشطة إلى خلايا تائية للذاكرة الجاهزة — تهاجر مجموعة فرعية منها إلى الجلد.

عند إعادة التعرض ، تقدم APCs الجين المناعي للخلايا التائية الجاهزة ، مما يؤدي إلى إطلاق السيتوكين المؤيد للالتهابات.

تحفز السيتوكينات الخلايا الكيراتينية والخلايا البدينة لإطلاق الكيموكينات ، والتي ترتبط بالعدلات المنتشرة ، مما يسهل تفرخها. تصل العدلات المنتشرة إلى موقع الالتهاب.

تنشط السيتوكينات العدلات لإنتاج إنزيمات محللة للبروتين وأنواع الأكسجين التفاعلية - مما يتسبب في تلف الأنسجة وتضخيم الالتهاب.

للبدء ، قم بتخدير الفأر بحقن داخل الصفاق من كوكتيل مخدر ، وتأكد من التخدير الكافي باستخدام اختبار قرصة إصبع القدم. بعد ذلك ، ضعي كريم إزالة الشعر على السطح الظهري لكلتا الأذنين. امسحها في غضون دقيقة واغسل الجلد بالماء.

قم بقياس سمك الأذن حيث تم إجراء التطبيقات باستخدام ميكرومتر. في وقت لاحق ، أعد الفأر في قفصه الخاص بعد تعافيه من التخدير ، واترك الفأر يرتاح لمدة ثلاثة أيام على الأقل قبل إجراء مزيد من الاختبارات.

بعد ثلاثة أيام ، أعد تخدير الفأر وقم بقياس سمك الأذن مرة أخرى للتأكد من عدم تهيجها. بعد ذلك ، ضع 12.5 ميكرولتر من 1.25٪ أوكسازولون على كل جانب من الأذن اليمنى ، وقم بتطبيق 12.5 ميكرولتر من محلول زيت الأسيتون وزيت الزيتون على كل جانب من الأذن اليسرى.

كما هو الحال دائما ، لاحظ أن الفأر يتعافى من التخدير. بعد 24 ساعة ، قم بقياس سمك الأذن مرة أخرى تحت التخدير ، للتأكد من حدوث التهاب الجلد الناجم عن الأوكسازولون.