نموذج فأر لالتهاب القزحية الفطري المفعم لدراسة التهاب القزحية التالي للعدوى

يطلق على التهاب العين المزمن ، أو التهاب القزحية ، بعد عدوى بكتيرية جهازية ، التهاب القزحية بعد العدوى.

لتوليد نموذج التهاب القزحية اللاحق للعدوى، خذ فأرا مخدرا تم تحصينه مسبقا بالمتفطرة السلية المقتولة بالحرارة أو Mtb. يولد التحضير - التعرض المسبق للجين المناعي - خلايا تائية منتشرة خاصة ب Mtb.

حقن نفس المناعة في التجويف الزجاجي للعين. تنتشر البكتيريا الفطرية من خلال الخلط الزجاجي ، وتنتشر عبر العين. تقيد حواجز الدم العينية دخول الخلايا المناعية إلى العين - مما يجعلها عضوا يتمتع بامتياز المناعة.

الخلايا العارضة للمستضد المقيمة في الأنسجة أو APCs - في المنطقة المحيطة بالأوعية الدموية - الجين المناعي المنتشر. عند استيعاب الجين المناعي ، تعالج APCs مستضد Mtb وتعرضه على السطح عبر مركب التوافق النسيجي الرئيسي أو معقد التوافق النسيجي الكبير.

تطلق APCs المنشطة أيضا السيتوكينات المؤيدة للالتهابات التي تسبب نفاذية حاجز الوصلة البطانية الضيق في الأوعية الدموية. تتسرب الكريات البيض ، بما في ذلك العدلات والخلايا التائية الخاصة ب Mtb ، إلى الفضاء المحيط بالأوعية الدموية.

ترتبط الخلايا التائية الخاصة ب Mtb بمستضدها على APCs وتطلق السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، والتي تحفز العدلات على إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية ، أو ROS ، وتسبب التحلل.

تتسبب البروتياز الحبيبي المنبعث وأنواع الأكسجين التفاعلية في تدهور حمة الأنسجة وانهيار حاجز العين الدموي - مما يؤدي إلى تفاقم الالتهاب.

نموذج العدوى جاهز للتحليل النهائي.

في يوم الحقن ، بعد التأكد من عمق التخدير العام ، قم بتخدير القرنية بقطرة واحدة من 0.5٪ من التتراكايين ، وتوسيع التلميذ بقطرة واحدة من 2.5٪ فينيل إيفرين. بعد التخلص من السوائل الزائدة ، أضيفي قطرة واحدة من 5٪ من البيتادين إلى سطح العين والشعر المحيط لتقليل خطر الإصابة بالتهاب باطن المقلة.

بعد دقيقتين إلى ثلاث دقائق ، قم بإزالة البيتادين ، وقم بتغطية العين بجل هيبروميلوز 0.3٪ لمنع الجفاف تحت التخدير وتكوين إعتام عدسة العين. بعد ذلك ، قم بتحميل حقنة سعة 10 ميكرولتر بمزيج المستضد والفلورسين. بعد ذلك ، ضع الماوس في وضع الانبطاح على المنصة واستخدم قضبان الأذن اليمنى واليسرى لإصلاح رأس الماوس.

ضع الفأر ووجهه تحت المنظار بحيث يكون الجانب الأنفي العلوي للعين اليمنى مرئيا. بعد ذلك ، باستخدام إبرة قياس 30 ، قم بإزاحة الرموش ، وفضح الصلبة ، وتصور الأطراف والأوعية الدموية الكعبرية.

بعد ذلك ، باستخدام إبرة معقمة قياس 30 ، قم بعمل ثقب توجيه في الصلبة من 1 إلى 2 ملم خلف الطيوف. بعد ذلك ، أدخل الإبرة قياس 34 المرفقة بحامل الحقن في العين من خلال فتحة التوجيه بزاوية تتجنب العدسة ، ولكن ضع طرف الإبرة في التجويف الزجاجي.

باستخدام وحدة التحكم في مضخة الحقنة الدقيقة ، قم بحقن 1 ميكرولتر من مستخلص السل M بعناية في التجويف الزجاجي. في حالة الارتجاع المستمر ، قم بزيادة حجم الحقن إلى 1.5 ميكرولتر لضمان توصيل الجرعة الكافية. تأكد من وضع الجسم الزجاجي عن طريق تصور منعكس أخضر في العين ، وبعد عشر ثوان ، قم بإزالة الإبرة من العين.