تقنية تزقيم داخل المعدة لعدوى هيليكوباكتر الخاضعة للرقابة في الفئران

لإنشاء نموذج عدوى هيليكوباكتر بيلوري ، ابدأ بفأر مخدر وخالي من مسببات الأمراض. كبح الماوس بإحكام لتقليل الحركة أثناء العملية.

خذ حقنة مملوءة بتعليق بكتيري. قم بتوصيل قسطرة البولي إيثيلين بإبرة المحقنة للتزقيم داخل المعدة — وهي تقنية لتوصيل المعلق مباشرة إلى المعدة.

أدخل القسطرة في وسط الفم المفتوح للوصول إلى المريء، وهو أنبوب عضلي يربط الفم بالمعدة. قم بتوجيه القسطرة برفق عبر المريء حتى تصل إلى المعدة ، وقم بتوصيل المعلق البكتيري مباشرة إلى بيئته الحمضية.

تفرز البكتيريا الملقحة اليورياز ، وهو إنزيم يحول اليوريا إلى أمونيا وثاني أكسيد الكربون. ترفع الأمونيا درجة الحموضة في المعدة ، مما يؤدي إلى تحييد الحموضة وتمكين البكتيريا من البقاء على قيد الحياة.

تستخدم هذه البكتيريا سوطها لاجتياز طبقة المخاط الواقية ، مما يسمح لها بالوصول إلى ظهارة المعدة ، حيث تلتصق بالخلايا باستخدام بروتينات الالتصاق. عند التعلق ، تطلق هذه البكتيريا عوامل ضراوة تعطل التقاطعات الضيقة بين الخلايا الظهارية.

يعزز هذا الاضطراب الهيكلي الغزو البكتيري والاستعمار في الأنسجة العميقة ، مما يؤدي في النهاية إلى إنشاء عدوى خاضعة للرقابة في المعدة.

أضف المعلقات البكتيرية إلى أنابيب البوليسترين سعة 15 مليلتر ، واستخدم حلقة بلاستيكية لنقل قطرة واحدة من 10 إلى 20 ميكرولتر من كل ثقافة إلى شرائح مجهر زجاجية فردية. بعد ذلك ، قم