لماذا تعد إجراءات القسطرة مهمة لضمان اتساق نموذج العدوى؟

يضمن القسطرة الموحدة توصيلاً بكتيريًا قابلاً للتكرار إلى تجويف المثانة، مما يقلل من التباين في ترسيخ العدوى بين الحيوانات.

كيف يُمكِّن سم α-hemolysin البكتيريا من الهروب من الحويصلات؟

تتجمع مونومرات سم α-hemolysin لتشكل معقدات مسامية في الغشاء الحويصلي، مما يسمح للبكتيريا بالانتقال إلى سيتوبلازم المضيف من أجل التكاثر.

ما الذي يحدد كمية تكوين المجتمع البكتيري داخل الخلايا في هذا النموذج؟

يتم تقييم تكوين IBC عن طريق المجهر أو التعداد البكتيري من متجانسات المثانة، مما يعكس التكاثر داخل الخلايا والتجمع الشبيه بالغشاء الحيوي.

لماذا يتم مراقبة تطور العدوى بمرور الوقت في ذكور الفئران؟

يساعد تتبع الانتشار البكتيري من IBCs إلى الخلايا المجاورة في تقييم التأثير العلاجي على انتشار العدوى واستمراريتها.

ما هي العتبات الإحصائية التي تحدد نجاح استقرار العدوى؟

يتم تحديد نجاح العدوى من خلال درجات جودة التقطير المحددة مسبقاً وقياسات الحمل البكتيري بعد التلقيح والتي تتجاوز المستويات الأساسية.

القسطرة عبر الإحليل والتلقيح البكتيري لتوليد نموذج عدوى المسالك البولية في ذكور الفئران

JoVE Encyclopedia of Experiments

علم المناعة

0 مشاهدات • 2:32 د • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

خذ فأرا ذكرا مخدرا وأدخل قسطرة في أعضائه التناسلية.

أدخل البكتيريا المسببة للأمراض البولية في مجرى البول. داخل المسالك البولية ، تلتصق البكتيريا بالخلية البولية الظهارية.

يؤدي تفاعل البروتينات السطحية البكتيرية مع بروتينات غشاء الخلية المضيفة إلى إعادة ترتيب الهيكل الخلوي مما يتسبب في التفاف غشاء الخلية المضيفة بإحكام حول البكتيريا من خلال آلية سحاب.

يتم استيعاب البكتيريا لاحقا داخل حويصلة مرتبطة بالغشاء. داخل الحويصلة ، تنتج البكتيريا مونومرات توكسين α هيموليسين التي تتجمع لتشكيل مركب مسام في الغشاء الحويصلي.

تهرب البكتيريا من خلال مركب المسام إلى سيتوبلازم الخلية المضيفة حيث تتكاثر لتشكيل مجتمعات بكتيرية داخل الخلايا ، أو IBCs. الحاويات الوسيطة للسوائب هي هياكل كثيفة تشبه الأغشية الحيوية داخل الخلايا المضيفة ، محمية من الهجوم المباشر من قبل الخلايا المناعية الموجودة في الفضاء خارج الخلية.

عندما تنضج البكتيريا المسببة للأمراض البولية داخل الحاويات الوسيطة للسوائب، فإنها تخرج في النهاية من الخلايا المضيفة لتصيب الخلايا المجاورة، مما يتسبب في التهابات المسالك البولية.

لتلقيح ذكور الفئران ، ضع ملقطين للإبهام في الجمجمة والذيلية على الأعضاء التناسلية الخارجية للفأر. اسحب القلفة لكشف حشفة القضيب بالكامل. بعد ذلك ، بمجرد وضع القضيب خارجيا ، حرر ملقط الإبهام. أعد وضع الملقط لتثبيت القضيب البارز بشكل عمودي على الحيوان ، مع إمساك العضو برفق ولكن مشدود. بعد ذلك ، من خلال الفتحة الصغيرة في طرف صماخ مجرى البول ، أدخل القسطرة بعناية وقم بتوجيهها برفق إلى القضيب باستخدام ملقط للحفاظ على التوتر برفق.

بمجرد أن يلتقي محور القسطرة بطرف القضيب ، ببطء شديد ، قم بتوزيع 50 ميكرولترا من اللقاح مع الحفاظ على موضع القضيب. لاحظ جودة التقطير وفقا لدرجة جودة التقطير المحددة مسبقا ، مثل تلك الموضحة هنا. اسحب القسطرة ببطء على مدى 5 ثوان لمنع تسرب اللقاح. ضع الفأر في قفصه في وضع ضعيف. يجب أن يبدأ في التعافي بعد 30 إلى 45 دقيقة من إعطاء التخدير.