تقنية لإنشاء نموذج عدوى بكتيرية في مزرعة الأعضاء خارج الجسم الحي

خذ مزرعة عضو المشيمة البشرية المزروعة على مصفوفة خارج الخلية ، أو ECM.

تظهر الثقافة بنية تشبه الزغابات مع مخلوي خارجي - طبقة متعددة النوى - وأرومات الغاذية الخلوية الأساسية ، أو CBTs ، والتي تتمايز إلى أرومة غخامية خارج الزغابات ، أو EVTs ، التي ترتكز في ECM.

إدخال Listeria monocytogenes ، وهي بكتيريا مسببة للأمراض.

ترتبط الإنترنالين - البروتينات السطحية البكتيرية - بمستقبلات EVT ، مما يسهل استيعاب البكتيريا عن طريق الالتقام الخلوي.

تفرز البكتيريا الداخلية السموم المكونة للمسام والفوسفوليباز التي تثقب الغشاء الفراغي ، مما يتوسط في تمزقه وهروب البكتيريا إلى السيتوبلازم.

تقوم

البكتيريا الهاربة بتجنيد الآلات المضيفة لبلمرة الأكتين ، مما يدفعها نحو غشاء الخلية المضيفة.

يؤدي

إفراز عامل الفوعة البكتيري إلى تكوين نتوء على الغشاء المضيف. تبتلع الخلايا المجاورة النتوء المحتوي على البكتيريا ، مما يتسبب في انتشار العدوى.

تنتشر البكتيريا عبر EVTs إلى العلاج المعرفي السلوكي الأساسي.

أضف مضادا حيويا لإزالة البكتيريا خارج الخلية ، وإعداد نموذج العدوى للتحليل.

قبل بدء العدوى ، قم بتلقيح مستعمرة L. monocytogenes واحدة من صفيحة أجار لتسريب الدماغ والقلب في 3 ملليلتر من مرق تسريب الدماغ والقلب. احتضان المزرعة طوال الليل في وضع مائل عند 30 درجة مئوية للسماح لنمو البكتيريا بالوصول إلى مرحلة ثابتة.

في ص