إنشاء عدوى أوراق نبات الأرز من خلال التلقيح الفطري عن طريق الجرح

ابدأ بطبق استزراع يحتوي على ورقة أرز بها جروح صغيرة ، مما يكشف البشرة الأساسية.

ضع محلول ترطيب يحتوي على Tween-20 ، مما يخلق بيئة مواتية لنمو الفطريات.

ضع سدادة فطرية من Magnaporthe grisea ، تتكون من كونيديوفورات مع كونيديا - جراثيم فطرية تكاثرية ، فوق الموقع المصاب.

احتضان الورقة في غرفة رطبة في ظل ظروف الفترة الضوئية لتعزيز نمو الفطريات.

أثناء الحضانة ، تطلق الكونيديوفورات جراثيم تلتصق بالبشرة المكشوفة ، مما يؤدي إلى تطوير الأنابيب الجرثومية

يتمايز الأنبوب الجرثومي إلى غطاء على شكل قبة ، والذي يولد ضغطا مرتفعا للتورم ، مكونا خيوطا حادة - أو ربط اختراق.

يفرز ربط الاختراق إنزيمات مهينة لجدار الخلية ، مما يسهل دخولها إلى خلية البشرة وتمايزها إلى خيوط غازية لاكتساب المغذيات.

تنمو هذه الخيوط وتنتشر داخل خلايا البشرة من خلال plasmodesmata - ربط القنوات بين الخلايا ، وإنشاء العدوى.

يفرز الفطر السموم ، مما يتسبب في نخر الخلايا وتكوين آفة بالقرب من الموقع المصاب على الأوراق ، مما يشير إلى عدوى فطرية.

باستخدام إبرة تشريحية ، اكشط ثلاثة جروح بطول 2 إلى 3 سم في الأوردة الرئيسية لأوراق الأرز المنفصلة. ضع الأوراق المكشطة على أعواد الأسنان ورشها بمحلول Tween-20. بعد ذلك ، قم بقص سدادة فطرية بحجم 1/2 × 1/2 سم من ألواح OTA التي تحتوي على كل سلالة M griseus. ضع المقابس على الأوراق المصابة ، واحتضنها في غرفة رطبة عند 25 درجة مئوية لمدة 3 إلى 8 أيام.

بعد فترة الحضانة ، قم بفحص وتقييم الآفات وفقا لنظام التسجيل المقدم من المعهد الدولي لبحوث الأرز. أخيرا ، قم بتصوير الأوراق المريضة لتقييم عدوى السلالات المختبرة.