التقطير داخل الشعب الهوائية للمكورات العقدية الرئوية في نماذج القوارض ذات الكفاءة المناعية

الحصول على جهاز تنبيب معقم يتكون من قنية معدنية مع أنابيب بولي إيثيلين متصلة بإبرة معدنية.

قم بتوصيل حقنة تحتوي على المكورات العقدية الرئوية بالإبرة ، واملأ الأنبوب.

بعد ذلك ، ضع فأرا مخدرا ذو كفاءة مناعية في وضع ضعيف.

أدخل الطرف الحر للقنية المعدنية في فم الفئران. ادفعها إلى القصبة الهوائية باتجاه الشعب الهوائية اليسرى وأسفل الرئة اليسرى إلى عمق مناسب.

تقدم الأنبوب إلى نهاية القنية وغرس المعلق البكتيري في فص الرئة الأيسر.

تمنع الكبسولة البكتيرية والإنزيمات المرتبطة بالسطح انحباس البكتيريا في المخاط. علاوة على ذلك ، ترتبط المكورات العقدية الرئوية بالمستقبلات السطحية على الخلايا الظهارية القصبية ، مما يسهل الالتقام الخلوي وإطلاقه إلى السطح القاعدي.

تفرز البكتيريا السموم التي تلحق الضرر بالخلايا الظهارية والحواجز، مما يؤدي إلى استجابة مناعية.

ومع ذلك ، طورت المكورات العقدية الرئوية استراتيجيات للتهرب من الاستجابة المناعية للمضيف وإنشاء عدوى الرئة.

ضع حصيرة نظيفة يمكن التخلص منها على سطح العمل بالقرب من الحمام المائي.

لتحضير سطح العمل وجهاز التنبيب ، أولا ، قم بتعقيم القنية المعدنية وأنابيب البولي إيثيلين وفقا لبروتوكول النص ، ثم قم بنقلها في أنبوب التخزين الزجاجي الخاص بها إلى سطح العمل. بعد ذلك ، قم بإزالة الغطاء من أنبوب التخزين وحرك طرف مقبض القنية إلى الطرف المفتوح للأنبوب. باستخدام ملقط معقم ، قم بإزالة طول واحد من أنابيب البولي إيثيلين من الدورق ، وأدخله من داخل القنية المعدنية المعقمة ، مع التأكد من أنها تتحرك بحرية. ضع علامة إرشادية في مكان محدد مسبقا بقلم لا يمحى.

بعد ذلك ، ضع إبرة معقمة يمكن التخلص منها عيار 25 على الطرف الحر لأنبوب البولي إيثيلين عن طريق تحريك الإبرة عدة ملليمترات في الأنبوب. بعد ذلك ، استخدم محلول ملحي معقم لملء حقنة جديدة سعة 1 ملليلتر يمكن التخلص منها. قم بتوصيل المحقنة بالإبرة المثبتة على أنبوب البولي إيثيلين ، واغسل الحجم الكامل للمحلول الملحي من خلال الأنبوب.

تخلص من المحقنة المستخدمة في حاوية الأدوات الحادة. بعد ذلك ، املأ حقنة جديدة معقمة سعة 1 مليلتر يمكن التخلص منها باللقاح القائم على أجار من الحمام المائي. أعد توصيل الإبرة والأنبوب قياس 25 وقم بتدفق الأجار عبر الأنبوب عن طريق الضغط على المكبس حتى يمتلئ الأنبوب بالكامل بالأجار.

بعد تخدير الجرذ وفقا لبروتوكول النص ، ضع في وضع ضعيف على السجادة التي تستخدم لمرة واحدة ، بحيث يكون الرأس متجها لليمين والذيل متجها لليسار. بعد ذلك ، أدخل الطرف الحر من القنية المعدنية في فم. اقلب القنية بحيث تكون النهاية الحرة مائلة لأعلى وتقدمها برفق إلى القصبة الهوائية ، متجاوزة بعناية الهياكل الحنجرية بحركة التواء طفيفة.

تأكد من إدخالها في القصبة الهوائية بدلا من المريء عن طريق تحريك القنية برفق للأمام والخلف عدة مرات ، مع استخدام السبابة اليسرى لجس حلقات القصبة الهوائية.

لضمان التنبيب في القصبة الهوائية وليس المريء ، حرك القنية ذهابا وإيابا قليلا واشعر بالتلال. إذا انزلقت القنية بسلاسة أسفل الحلق ولا يمكن الشعور بالنتوءات ، فقم بإزالة الجهاز وحاول مرة أخرى.

عندما تصل القنية إلى التشعب حيث تنقسم القصبة الهوائية إلى القصبات الهوائية اليمنى واليسرى ، قم بحركة التواء طفيفة باتجاه الجانب الأيسر للحيوان لضمان إدخال القنية في القصبة الهوائية اليسرى.

من الأخطاء الشائعة عدم وضع اللقاح بعمق كاف في الرئة ، مما قد يسد الشعب الهوائية ويمنع التنفس. عندما يتم تشغيل القنية إلى الزاوية المناسبة ، يجب أن تنزلق بسهولة إلى القصبات الهوائية اليسرى ، وتتقدم بسلاسة إلى العمق المناسب.

تقدم القنية المعدنية حتى تصل النهاية إلى منتصف الطريق إلى 3/4 أسفل الرئة اليسرى ، باستخدام علامة التوجيه الموضوعة مسبقا للتأكد من الوصول إلى العمق المناسب. مع وضع القنية المعدنية في مكانها ، قم بتقديم أنبوب البولي إيثيلين عدة ملليمترات باستخدام علامة التوجيه الموضوعة مسبقا على الأنبوب للتأكد من تقدمه بما يكفي فقط للخروج من نهاية القنية المعدنية وعدم ثقب الرئة.

مع وضع كلتا القنيات في مكانها ، استخدم المحقنة المرفقة لغرس 100 ميكرولتر من تعليق أجار في عمق الفص الكبير للرئة اليسرى. اسحب عدة ملليمترات من الأنبوب ، وقم بإزالة جهاز التنبيب السليم برفق. ضعه مرة أخرى في أنبوب التخزين الزجاجي وانقل إلى قفص جديد للتعافي.