JoVE Encyclopedia of Experiments
علم المناعة
0 مشاهدات • 4:55 د • July 8th, 2025
ابدأ بفأر تدخل جراحيا مع كشف بطنه.
حدد موقع القناة الليمفاوية المساريقية العلوية، التي تقع بشكل عمودي على الكلية اليمنى وموضوعة أمام الشريان المساريقي وبالتوازي معه.
مرر ملقطا مستقيما عبر فراش الدهون حول الكلى.
اسحب قنية ليمفاوية من خلال سرير الدهون حول الكلى ، ووضع أحد طرفيها بجوار القناة الليمفاوية والسماح للطرف الآخر بالبروز خارج جسم.
بعد ذلك ، قم بعمل شق صغير في القناة الليمفاوية.
املأ القنية بمحلول مضاد للتخثر وأدخلها في القناة الليمفاوية.
داخل القناة ، يحتوي السائل الليمفاوي على العديد من الجزيئات الحيوية بما في ذلك عوامل التخثر التي تؤدي إلى سلسلة من الأحداث التي تؤدي إلى تكوين الجلطة.
ومع ذلك ، فإن مضاد التخثر يرتبط بعوامل التخثر ، مما يثبط نشاطها.
هذا يمكن السائل الليمفاوي غير المتأخثر من التدفق بحرية عبر القنية.
ضع مادة لاصقة بيطرية على فتحة المدخل لتثبيت القنية في مكانها.
في اليوم السابق للجراحة ، قم بقص القنيات إلى الأطوال المناسبة ، واستخدم شفرة جراحية معقمة لعمل شطبة عند طرف كل قطعة من الأنبوب. بعد ذلك ، لتحضير القنية داخل الاثني عشر ، قم بلف القنية مرة أخرى على نفسها ، ثم قم بتسخين القنية لإنشاء نقطة ربط في الأنبوب.
في يوم الجراحة ، احلق الفراء من الجانب الأيمن من البطن والرقبة ومناطق الترقوة اليسرى لفأر بالغ مخدر ، ثم نظف المناطق الجراحية بشكل معقم باستخدام ثلاثة محلول بوفيدون يود متتالي و 70٪ من دعك الإيثانول.
لقنية القناة الليمفاوية المساريقية ، ضع بحيث يكون جانبه الأيمن متجها لأعلى واستخدم شفرة مشرط معقمة لفتح الطبقة العليا من جدار عضلة البطن بشق مستقيم بطول أربعة سنتيمترات يمتد من عملية الخنجري إلى الجانب الأيمن ، حوالي سنتيمترين تحت الهامش الساحلي.
اسحب الأمعاء الدقيقة تحت جدار البطن الأيسر ، واستخدم قطعتين إلى ثلاث قطع من الشاش المعقم المشبع بمحلول ملحي عادي لإبقائها في مكانها. بعد ذلك ، قم بجسر الجرذ فوق حقنة بلاستيكية سعة 10 مليلتر موضوعة أفقيا تحت ظهر على مستوى الكلية اليمنى للمساعدة في تصور القناة الليمفاوية المساريقية.
حدد موقع القناة الليمفاوية المساريقية العلوية ، التي يبلغ قطرها حوالي 0.5 إلى 1 ملم ، عموديا على الكلية اليمنى ، ومنقارية على الفور وموازية للشريان المساريقي النابض الأحمر الداكن. لاحظ أنه في الفئران غير الصائمة ، كما هو موضح هنا ، تكون القناة الليمفاوية المساريقية العلوية بيضاء وغير شفافة وأسهل في التصور من الفئران الصائمة.
بعد ذلك ، مرر زوجا من الملقط المستقيم عبر فراش الدهون حول الكلى في الهامش السفلي للكلية اليمنى الموازي للقناة الليمفاوية المساريقية العلوية ، ومن خلال طبقات النسيج الضام ، أسفل الوريد الأجوف مباشرة. بعد ذلك ، باستخدام طرف الملقط ، اسحب القنية الليمفاوية عبر فراش الدهون حول الكلى مع أحد طرفيه بجوار القناة الليمفاوية المساريقية مباشرة ، والآخر خارج على مستوى الكلية اليمنى.
بعد ذلك ، باستخدام المجهر الجراحي وملقط الصائغ ، قم بعزل القناة الليمفاوية المساريقية من خلال الطبقات العلوية من الأنسجة الضامة والدهنية عن طريق التشريح الحاد ، بدءا من الطرف السفلي مع الحرص على عدم إتلاف القناة الليمفاوية. عندما يتم عزل القناة ، استخدم طرف الملقط ذي الطرف الدقيق لإحداث ثقب صغير في القناة الليمفاوية. بعد التأكد من أن القنية الليمفاوية مملوءة بالكامل بمحلول مضاد للتخثر وعدم وجود فجوات هوائية ، استخدم زوجا صغيرا من الملقط لإدخال القنية الليمفاوية حوالي ملليمترين إلى أربعة ملليمترات داخل القناة الليمفاوية المساريقية عبر البزل.
إذا نجحت القنية ، ملاحظة التدفق التدريجي للغف المعوي من نهاية التجميع الحر للقنية. عندما يحدث هذا ، ضع قطرة صغيرة من غراء cyanoacrylate فوق فتحة المدخل في القناة الليمفاوية لتأمين القنية ، مع الحرص على عدم انسداد الوعاء بالغراء الزائد.