موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:31 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بثقافة البلاعم الملتصقة.
أضف السيتوكينات المؤيدة للالتهابات.
يرتبط السيتوكين بمستقبلات سطح البلاعم ، مما يؤدي إلى سلسلة من الأحداث الالتهابية.
أولا ، تؤدي إشارات السيتوكين إلى إنتاج الببتيدات المضادة للميكروبات.
في الوقت نفسه ، يخضع الكروماتين داخل نواة البلاعم لإزالة التكثيف.
هذه العملية ، إلى جانب التغيرات في تكوين الغشاء ، تعطل الغشاء النووي ، وتطلق الكروماتين غير المكثف في السيتوبلازم.
في السيتوبلازم ، يتفاعل الببتيد المضاد للميكروبات مع الكروماتين المنبعث.
يتسبب نفاذية غشاء الخلية بوساطة إشارات السيتوكين في إطلاق الكروماتين غير المكثف في الفضاء خارج الخلية ، مما يشكل مصيدة البلاعم خارج الخلية ، أو MET.
تتكون هذه الهياكل الشبيهة بالويب من الحمض النووي والهيستونات والجزيئات المضادة للميكروبات والإنزيمات.
أضف SYTOX green ، وهي صبغة حمض نووي فلورية ترتبط بشكل انتقائي بالحمض النووي المكشوف في المصائد خارج الخلية.
تحت المجهر الفلوري ، يظهر MET على شكل خطوط خضراء من الحمض النووي خارج الخلية المنبعثة من البلاعم المحفزة.
في ظل ظروف معقمة ، قم بإعداد وسائط الاستزراع التي تحتوي على محفزات مختلفة لإطلاق MET إلى وسائط RPMI 1640 الكاملة. لإجراء تجارب على تحفيز حمض هيبوكلوروس ، قم بإعداد 200 ميكرومولار من حمض هيبوكلوروس في أنبوب فالكون مع HBSS الذي تم تسخينه مسبقا إلى 37 درجة مئوية.
بعد
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية