فحص السمية الخلوية لسلالات المكورات العنقودية الذهبية على العدلات بعد البلعمة

تناول سلالات المكورات العنقودية الذهبية الخبيثة والأقل ضراوة.

أضف المصل لتقوية البكتيريا.

نقل التركيزات البكتيرية المتزايدة إلى آبار الصفائح متعددة الآبار المبردة التي تحتوي على العدلات. تمنع درجات الحرارة المنخفضة تنشيط العدلات.

أجهزة الطرد المركزي لتسهيل البلعمة المتزامنة.

تربط مستقبلات العدلات الأوبسونين ، مما يؤدي إلى استيعاب البكتيريا في البلعمة.

في البكتيريا الخبيثة ، تؤدي البيئة البلعمية إلى التعبير عن السموم المحللة للخلايا.

تشكل هذه السموم مساما ، مما يعطل البلعمة ويعرض سلامة غشاء العدلات للخطر.

ومع ذلك ، فإن البكتيريا الأقل ضراوة تظهر تعبيرا منخفضا عن السموم المحللة للخليات.

بعد الحضانة ، افصل العدلات وانقلها إلى أنابيب مقياس التدفق الخلوي التي تحتوي على صبغة يوديد بروبيديوم الفلورية (PI).

تدخل

الصبغة إلى العدلات بأغشية مخترقة وتلطخ الحمض النووي.

باستخدام مقياس التدفق الخلوي ، قم بتحليل العدلات لتلوين PI.

تشير الزيادة المعتمدة على التركيز في نسبة العدلات الإيجابية PI بعد البلعمة للسلالة الخبيثة ، مقارنة بالسلالة الأقل ضراوة ، إلى السمية الخلوية للسلالة الخبيثة ضد العدلات.

عندما يصل المكورات العنقودية الذهبية المستزرعة إلى منتصف النمو الأسي ، انقل 1 مليلتر من البكتيريا المستزرعة إلى أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مليلتر ، وجهاز طرد مركزي عند 5000 جم لمدة 5 دقائق في درجة حرار