تقييم ضراوة الليشمانيا داخل الضامة المستنبتة

ابدأ بلوحة متعددة الآبار تحتوي على ضامة مشتقة من نخاع العظام على أغطية.

عالج البلاعم باستخدام ليشمانيا البروماستيجوت — المرحلة المعدية للطفيلي.

أثناء الحضانة ، تتفاعل الطفيليات مع الضامة ، مما يسهل تجميع F-actin حول موقع التفاعل.

تبتلع البلاعم الطفيليات في البلعمات المحاطة بالأكتين F ، وتشكل فجوات طفيلية أو PVs - مكانة تكاثرية.

داخل PVs ، تطلق الطفيليات عوامل البقاء على قيد الحياة ، مما يزيد من تراكم F-actin حول الفجوات وتمنع اندماجها مع الجسيمات الحالة.

بالإضافة إلى ذلك، تعمل الطفيليات على تنظيم إنتاج الهيبسيدين — وهو هرمون ببتيد بلامفاج، مما يثبط إفراز الحديد ويرفع مستويات الحديد داخل الخلايا.

يعزز تدفق الحديد إلى الفجوات تمايز البروماستيجوت إلى مسببة للأمراض ويسهل تكاثرها ، مما يعزز الفوعة.

بعد الحضانة ، اغسل لإزالة الطفيليات الحرة ، ثم قم بإصلاح البلاعم المصابة ونفاذها.

أدخل صبغة فلورية من الحمض النووي لتلطيخ نوى البلاعم والمصابات المصابة.

تحت المجهر الفلوري ، تؤكد النوى الصغيرة المتجمعة حول النواة الكبيرة للبلاعم وجود طفيليات داخل الخلايا ، مما يدل على ضراوة الليشمانيا.

في اليوم السابع أو الثامن بعد الزراعة ، استخدم طرف شفط مثبت على خط تفريغ لنقل أربعة أغطية زجاجية معقمة بالأوتوكلاف مقاس 12 ملم إلى قاع كل بئر من صفيحة ثقافة مكونة من ستة آبار دون تداخل. قم بإعداد لوحات متطابقة