موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:28 دقيقة • July 8th, 2025
ابدأ بثقافة الخلايا البطانية.
استبدل الوسائط بوسائط لاهوائية. احتضان في غرفة لاهوائية لتحقيق التوازن في درجة الحرارة.
أضف Porphyromonas gingivalis ، وهي بكتيريا لاهوائية مسببة للأمراض ، واحتضنها لفترة وجيزة.
تمتلك البكتيريا إسقاطات بروتينية ، تعرف باسم fimbriae ، والتي ترتبط بجزيئات التصاق معينة على الخلايا البطانية ، مما يسهل التصاق البكتيريا.
يؤدي هذا الارتباط إلى شلالات إشارات داخل الخلايا ، مما يؤدي إلى إعادة ترتيب الهيكل الخلوي للأكتين واستيعاب البكتيريا في البلعمة.
بعد الحضانة ، قم بإزالة الوسائط. يغسل بمحلول لاهوائي لإزالة البكتيريا خارج الخلية غير الملتصقة.
أضف منظفا معتدلا لاختراق أغشية الخلايا المضيفة وتحفيز تحلل الخلايا ، وإطلاق البكتيريا الداخلية والمرتبطة بالسطح دون التسبب في ضرر.
تمييع البكتيريا المحتوية على المحللة بالوسائط وإعداد التخفيفات التسلسلية.
ضع هذه التخفيفات على ألواح أجار الدم. احتضان في ظل ظروف لاهوائية للسماح ل Porphyromonas gingivalis بالتكاثر وتشكيل مستعمرات.
بعد الحضانة ، قم بحساب وحدات تكوين المستعمرة (CFUs) على كل لوحة لتحديد البكتيريا المرتبطة بالسطح والداخلية ، مما يشير إلى تفاعلات الخلايا المضيفة للبكتيريا.
للاستزراع والتجريب مع Porphyromonas gingivalis ، يتم الحفاظ على غرفة الفينيل اللاهوائية مع جو اصطناعي يحتوي على 80٪ نيتروجين و 10٪ هيدروجين و
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية