تقنية لتقييم توطين الأجسام المضادة الخاصة بالورم في الجسم الحي

خذ معلق خلايا سرطان المبيض البشري. أضف وسط مصفوفة غشاء القاعدي ، واستمر في وضع الثلج لتجنب تكوين الهلام.

قم بتحميل الخليط في حقنة وحقنها تحت الجلد في فأر عاري رياضي. قم بإزالة الإبرة بمجرد خضوع المصفوفة للتبلور ، مما يمنع طرد الخليط.

يحافظ عدم وجود استجابة مناعية في الفأر الذي يعاني من نقص المناعة على صلاحية الخلايا المحقونة. توفر بروتينات المصفوفة خارج الخلية وعوامل النمو في الجل إشارات معززة للنمو ، مما يسهل تكوين الورم.

تفرط الخلايا السرطانية في التعبير عن مستقبلات حمض الفوليك المرتبطة بالسطح alpha-1 أو FOLR1.

خذ الأجسام المضادة الخاصة ب FOLR1. أضف صبغة فلورية واحتضانها ، مما يسمح باقتران الصبغة مع الأجسام المضادة.

حقن الأجسام المضادة المصنفة عن طريق الوريد في الفأر الحامل للورم المخدر.

تصل الأجسام المضادة إلى الورم عن طريق الدورة الدموية وترتبط ب FOLR1 على الخلايا السرطانية ، مما يؤدي إلى وضع علامات فلورية على سطح الخلية.

أداء التصوير الفلوري في الجسم الحي. عند الإثارة ، تنبعث الصبغة من التألق ، مما يسهل تقييم توطين الأجسام المضادة في الورم.

غسيل 0.5 مل من الجسم المضاد باستخدام كاسيت غسيل الكلى في 1 لتر من المخزن المؤقت للاقتران. بعد أربع ساعات ، انقل كاسيت غسيل الكلى إلى مخزن مؤقت جديد ، وقم بغسيل الكلى طوال الليل. لإعداد تفاعل اقتران ، أضف 0.03 ميكروغرام من IRDye 800CW لكل 1