موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:27 دقيقة • July 8th, 2025
خذ مزرعة الخلايا السرطانية ببروتينات السيتوبلازمية المصنفة بالفلورسنت.
أضف الخلايا القاتلة التي يسببها السيتوكين أو خلايا CIK — الخلايا التائية المستجيبة ذات الخصائص الطبيعية الشبيهة بالخلايا القاتلة — التي تمتلك نشاطا مضادا للورم.
ترتبط مستقبلاتالمجموعة القاتلة الطبيعية 2 D أو NKG2D على خلايا CIK بالبروتينات المحفزة للإجهاد على الخلايا السرطانية.
يحفز الارتباط خلايا CIK على إطلاق سموم حبيبات السيتوبلازمية - البيرفورين والجرانزيم.
تشكل البرفورينات مساما في غشاء الخلية السرطانية ، مما يسمح بدخول الجرانزيم ، التي تنشط الكاسبيس ، مما يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج.
بعد الحضانة ، حصاد الخلايا. أضف صبغة صلاحية الخلية المرتبطة بالحمض النووي الفلوري.
تدخل الصبغة من خلال غشاء الخلية التالف وترتبط بالحمض النووي ، مما ينتج عنه خلايا ميتة مزدوجة التلغين.
مع غشاء الخلية السليم ، تكون الخلايا الحية غير منفذة للصبغة.
مرر الخلايا عبر مقياس التدفق الخلوي للكشف عن الخلايا الحية التي تعرض مضان واحد وخلايا ميتة ذات مضان مزدوج.
قم بإنشاء مخطط مبعثر لقياس النسبة المئوية للخلايا السرطانية الميتة ، وتحديد التأثير السام للخلايا لخلايا CIK.
لإجراء الفحص السام للخلايا ، قم بالزراعة المشتركة ل CIK وخلايا سرطان الدم النخاعي المزمن البشرية K562 ، عن طريق إضافة 1 مليلتر من خلايا K562 إلى كل بئر في صفيحة مكونة من
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية