تلطيخ الخلايا البكتيرية والتحضير للدراسات المناعية

ابدأ بأنبوب يحتوي على مزرعة بكتيرية في المرحلة الأسية ، مما يضمن بكتيريا موحدة ونشطة النمو للحصول على نتائج متسقة.

جهاز طرد مركزي لجمع الخلايا ؛ استنشاق المادة الطافية المحتوية على الحطام ، وإعادة تعليق الخلايا.

أدخل صبغة فلورية حمراء نفاذة للخلايا. تخترق جزيئات الصبغة غشاء الخلية البكتيرية وتصل إلى النواة ، وترتبط بالحمض النووي وتنقل مضان أحمر إلى البكتيريا.

جهاز طرد مركزي لتكوير البكتيريا الملطخة وشفط المواد الطافية المحتوية على الصبغة غير المنضمة.

أعد تعليق البكتيريا في وسط نمو للحفاظ على بقاء الخلية.

باستخدام مقياس ضوئي ، قم بقياس امتصاص المعلق البكتيري المخفف عند 600 نانومتر.

قارن قيمة الامتصاص بمنحنى قياسي لتحديد تركيز البكتيريا.

انقل الحجم المطلوب من المعلق البكتيري الملون إلى أنبوب جديد يحتوي على وسط نمو. هذا لتحقيق التركيز البكتيري المطلوب لعدوى الخلية المضيفة التي تمثل تعدد العدوى ، أو وزارة الداخلية.

البكتيريا الملطخة مع وزارة الداخلية المطلوبة جاهزة للدراسات المناعية.

أولا ، حصاد المزارع البكتيرية في مرحلة أسية عن طريق الطرد المركزي عند 13,000 مرة جم لمدة دقيقتين في درجة حرارة الغرفة. بعد غسل بيليه الخلية بواحد مليلتر PBS ، أعد تعليق الحبيبات البكتيرية في مليلتر واحد PBS.

تحديد تركيزات المعلق البكتيري عن طريق قياس الكثافة البصرية عند 600 نانومتر. بعد ذلك ، لتلطيخ المعلق