موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:12 دقيقة • July 8th, 2025
خذ فأرا مخدرا محصنا مسبقا بالمتفطرة السلية المقتولة بالحرارة ، أو Mtb ، والتي تحفز استجابة مناعية ، وتولد خلايا تائية خاصة ب Mtb.
قم بتطبيق قطرات العين لتوسيع حدقة العين لتعزيز تغلغل الضوء لتحسين تصوير العين. ضع جل لمنع جفاف القرنية.
لف الماوس بشاش للحفاظ على دفء الجسم وضعه في التصوير المقطعي البصري أو نظام OCT.
صور العينين للحصول على صور مقطعية للغرفة الأمامية ، بما في ذلك القرنية والعدسة ، والغرفة الخلفية ، بما في ذلك شبكية العين.
افحص للتأكد من عدم وجود التهاب.
حقن Mtb المقتول بالحرارة في التجويف الزجاجي. ينتشر الجين المناعي عبر العين ويؤدي إلى استجابة مناعية ، مما يؤدي إلى تسلل الخلايا التائية الخاصة ب Mtb والخلايا المناعية الأخرى ، مما يؤدي إلى التهاب يسمى التهاب القزحية.
يكشف OCT للغرفة الأمامية عن الخلايا المناعية المتسللة ووذمة القرنية ، بينما يشير OCT للغرفة الخلفية إلى التهاب الجسم الزجاجي.
سجل صور OCT بناء على شدة الالتهاب لتحديد تطور التهاب القزحية.
بعد تخدير الفأر ، قم بتوسيع حدقة العين بقطرة واحدة من 2.5٪ فينيليفرين ، وتجنب دخول القطرات الزائدة إلى الأنف أو الفم. بعد دقيقتين إلى ثلاث دقائق ، تخلص من السائل الزائد ، وقم بتغطية العين بجل هيبروميلوز 0.3٪. بعد ذلك ، لف الماوس بطبقة من الشاش الجراحي للحفاظ على دفء الجسم ، ثم ضع الماوس على كاسيت ، وضع الرأس بشريط العض.
للحصول على التصوير المقطعي للتماسك البصري ، أو صور OCT ، قم بتشغيل نظام التصوير OCT ، وافتح برنامج التصوير. لتصوير الغرفة الخلفية ، قم بتقريب OCT من سطح العين ، مع الحرص على عدم ملامسة سطح العدسة للعين.
بمجرد وضع العين بشكل صحيح ، أوقف الفحص السريع ، وحدد بروتوكول المسح الضوئي لمستوى الصوت ، وقم بتنشيط الفحص باستخدام خيار التصويب. بالنسبة لصور المقطع الخلفي، اضبط حتى يتمركز العصب البصري في صورة محاذاة B-Scan الأفقية وتتم محاذاة شبكية العين مع محور المحاذاة الرأسي. بالنسبة لصور المقطع الأمامي، اضبط الموضع لتوسيط قمة القرنية في كل من صورة محاذاة B-Scan الأفقية وصورة محاذاة B-Scan الرأسية. أخيرا ، انقر فوق لقطة لالتقاط صورة مسح مستوى الصوت. ثم انقر فوق حفظ.