موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:40 دقيقة • July 8th, 2025
خذ خلايا سرطان الدم في وسط النمو دون تحفيز عوامل مثل السيتوكينات ، واحتضنها.
يسمح عدم وجود عوامل محفزة للبروتينات الفسفرة داخل الخلايا بالخضوع لإزالة الفسفرة والعودة إلى حالاتها الأصلية.
جهاز الطرد المركزي وإزالة الوسائط. أعد تعليق الخلايا في السدى الطافي الذي يحتوي على السيتوكين أو الليمفاوية اللحمية الصعترية أو TSLP.
يرتبط TSLP بمستقبله على خلية سرطان الدم ، مما يؤدي إلى إضعاف المستقبلات.
هذا يجعل الكينازات المرتبطة ب Janus ، أو JAKs ، أقرب ، مما يسهل نقل الفسفرة المتبادل.
تقومJAKs المنشطة بفسفرة ذيول السيتوبلازمية للمستقبل ، مما يخلق مواقع إرساء لمحول الإشارة ومنشط النسخ ، مونومرات STAT.
بمجرد أن تكون الفسفرة ، تتضاءل STATs وتنفصل عن المستقبل لتنظيم العمليات الخلوية في اتجاه مجرى النهر.
قم بإصلاح الخلايا للحفاظ على حالات الفسفرة للبروتينات داخل الخلايا.
عالج الخلايا بمحلول نفاذية لزيادة نفاذية غشاء الخلية.
أضف الأجسام المضادة المصنفة بالفلورسنت لتسمية البروتينات الفسفرية.
يرتبط قياس التدفق الخلوي لإشارة التألق بفسفرة STAT التي يسببها TSLP.
للتحقق من صحة المادة الطافية المنتجة من السدى المصمم هندسيا ، قم بإذابة عينات الطاف التي تم حصادها من التحكم في السدى الذي يعبر عن السيتوكينات ، ولوحة 3 آبار من خطوط خلايا سرطان الدم لكل حالة في وسط R20 عند 2 في 10 إلى الخلايا الخامسة لكل ترك
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية