تصور البكتيريا في أقسام خزعة المثانة عن طريق التهجين الموضعي الفلوري

ابدأ بشريحة زجاجية تحمل قسما من أنسجة خزعة المثانة البولية المصابة بإزالة البارافينات والمعاد ترطيبها تحتوي على بكتيريا مسببة للمسالك البولية.

أدخل مجسات عالمية ذات علامة فلورسنت - قليل النوكليوتيد تكميلي أحادي الشريطة خاص بالمنطقة المحفوظة من الحمض النووي الريبي الريبوزومي البكتيري 16s ، أو 16s-rRNA.

احتضن الشريحة في الظلام عند درجة حرارة مرتفعة للحصول على التهجين الأمثل.

أثناء الحضانة ، يتم تهجين المجسات حصريا إلى المنطقة المحفوظة على 16s-rRNA البكتيرية ، مما يضفي مضان أخضر على البكتيريا.

بعد التهجين ، اغسل بمخزن مؤقت مسخن مسبقا لإزالة المجسات غير المرتبطة.

قم

بتلطيخ قسم الأنسجة بصبغة Hoechst وعلامات البروتين الخلوية المسماة بالفلوروفور.

ترتبط جزيئات Hoechst بالحمض النووي ، مما يؤدي إلى تلطيخ النوى باللون الأزرق ، بينما تتفاعل العلامات المسماة بالفلوروفور مع مكونات خلوية معينة مثل خيوط الميوسين والأكتين ، مما يضفي مضان أحمر في قسم الخزعة.

اغسل الشريحة وأضف وسائط التثبيت إلى قسم الأنسجة.

تحت المجهر متحد البؤر ، يؤكد التألق الأخضر داخل قسم خزعة المثانة الحامل للفلورة الحمراء البكتيريا المرتبطة بالأنسجة.

قم بإعداد غرفة ترطيب لكل مسبار عن طريق إضافة منديل مهمة مبلل ومتجعد ودقيق وماء معقم إلى خزان صندوق الأطراف P1000. ضع خرطوشة حامل الطرف في الأعلى ، حيث ستجلس الشرائح. عند اكتمال الغس