موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:54 دقيقة • July 8th, 2025
خذ معلقا لخلايا جوركات — خلايا ابيضاض الدم في الخلايا الليمفاوية التائية.
امزج كمية مع صبغة صلاحية الخلية وتأكد من عدد كاف من الخلايا الحية.
ضع الخلايا في طبق استزراع وقم بتطبيق الأشعة فوق البنفسجية C أو UVC ، والإشعاع للمدة المطلوبة.
يخترق الأشعة فوق البنفسجية الخلايا ويمتصه الحمض النووي ، مكونا منتجات ضوئية بيريميدين.
بعد التشعيع ، احتضان الخلايا. يؤدي تلف الحمض النووي الواسع النطاق بوساطة الأشعة فوق البنفسجية إلى بدء مسار موت الخلايا المبرمج الجوهري ، مما يؤدي إلى تنشيط البروتينات المؤيدة لموت الخلايا المبرمج على غشاء الميتوكوندريا الخارجي.
تتحول البروتينات المنشطة إلى قلة القلة ، وتشكل مسام غشائية وتطلق السيتوكروم C من الفضاء بين الغشاء في السيتوبلازم.
مجمعات السيتوكروم C مع عامل تنشيط البروتياز موت الخلايا المبرمج -1 ، وتشكيل مركب المبرمج. ينشط الجوب المبرمج الكاسباسات ، مما يسبب موت الخلايا المبرمج.
أدخل الملحق V المسمى بالفلوروفور لتسمية الفوسفاتيديل سيرين على الغشاء ، وعلامة خلية موت الخلايا المبرمج ، وإضافة يوديد البروبيديوم الذي يدخل من خلال الغشاء التالف لتسمية الحمض النووي.
باستخدام قياس التدفق الخلوي ، حدد الخلايا المبرمج المبكرة المسمى V والخلايا المبرمج المتأخرة ذات الصبغة المزدوجة.
ابدأ بزراعة الخلايا التائية جوركات في وسط زراعة الخلايا القاعدية ، المكملة وفقا لتوجي
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية