تصوير الطور الكمي ثلاثي الأبعاد لتوصيف الأنواع الفرعية للخلايا الليمفاوية

قم بتحميل معلق من النوع الفرعي للخلايا الليمفاوية في غرفة التصوير.

ضع الغرفة على مرحلة مجهر التصوير الكمي ثلاثي الأبعاد.

اضبط معلمات المجهر والمستوى البؤري للحصول على التصوير الأمثل.

أثناء تصوير الخلايا الليمفاوية ، ينقسم شعاع الليزر إلى حزم مرجعية وعينات.

يسمح جهاز المرايا الدقيقة الرقمي ، الذي يتميز بمصفوفة مرآة صغيرة في مسار شعاع العينة ، للحزمة بالدوران 360 درجة حول المحور البصري.

تخضع كل حزمة تمر عبر الخلايا الليمفاوية لتحول طور بناء على اختلافات معامل الانكسار داخل الخلية.

تتجمع العينة الناتجة والحزم المرجعية ، وتشكل صورة ثلاثية الأبعاد ثنائية الأبعاد.

يتم التقاط سلسلة من الصور المجسمة التي تحتوي على معلومات الطور والسعة من زوايا مختلفة من خلال دوران الحزمة حول الخلايا الليمفاوية.

الحصول على صور ثلاثية الأبعاد متعددة في الخلفية بزوايا إضاءة متفاوتة، باستثناء الخلايا الليمفاوية.

باستخدام خوارزمية التصوير المقطعي للحيود ، أعد بناء الصور المجسمة في مقطعي ثلاثي الأبعاد بمعامل الانكسار ثلاثي الأبعاد ، مما يوفر معلومات مورفولوجية وكيميائية حيوية للخلايا الليمفاوية دون الحاجة إلى وضع العلامات.

للحصول على التصوير الأمثل ، قم بتخفيف كل عينة خلية بتركيز 180 خلية لكل ميكرولتر من وسط RPMI ، وحقن 120 ميكرولترا ببطء من العينة المخففة الأولى في غرفة التصوير. بعد التأكد من عدم وجود فقاعات دا