تقنية في المختبر لتصور إفراز الخلايا الإفرازية في الخلايا البدينة

خذ غطاء زجاجيا يحتوي على خلايا بدينة - خلايا مناعية ذات حبيبات إفرازية ، أو SGs ، تحتوي على وسطاء التهابيين.

أضف الأجسام المضادة IgE جنبا إلى جنب مع محضر الفلورسنت الحساس للأس الهيدروجيني ، واحتضن.

ترتبط الأجسام المضادة بمستقبلات Fc على الخلايا البدينة. يتم استيعاب المراسلين عن طريق كثرة الخلايا ، وتندمج الجسيمات الداخلية الناتجة مع SGs.

قم بإزالة الوسائط. أضف مستضد يحتوي على العديد من حواتم ربط IgE. ضع الشريحة تحت المجهر الفلوري ، وقم بتطبيق الطول الموجي المطلوب للإثارة

يعمل الرقم الهيدروجيني الحمضي ل SGs على إخماد مضان المراسل.

يرتبط المستضد بمجمعات مستقبلات IgE على سطح الخلية ، ويربط بينها.

يؤدي

تجميع المستقبلات بوساطة المستضد إلى هجرة SGs نحو غشاء البلازما.

تتوسط بروتينات SNARE على البلازما وغشاء SG اندماج الغشاء وتصريف شحنات SG ، والتي تسمى إفراز الخلايا.

يتسبب ارتفاع درجة الحموضة في الوسط في قلوية SG ، مما يحفز المراسلين على استعادة التألق.

تندمج SGs الواردة مع تلك المنصهرة بالغشاء. تتوسط قلوية SG الثانية في استعادة التألق ، مما يؤكد إفراز الخلايا المركب.

أضف 10 ميكرولترات من تعليق الخلية إلى غطاء زجاجي مع وسائط استزراع جديدة مكملة ب FITC-dextaren ، وقم بتنمية خلايا RBL بين عشية وضحاها. أولا ، قم بإعداد حل المخزن المؤقت النهائي ل Tyrode وفقا لبروتوكول النص. بعد ذلك ، قم بإعدا