موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 6:34 دقيقة • July 8th, 2025
خذ معلقا من Bacillus anthracis المقتول كيميائيا والمصنف بالفلورسنت.
توفرالكبسولة البكتيرية ، المكونة بشكل أساسي من حمض بولي جاما الجلوتاميك ، الحماية ضد البلعمة.
خذ مصل الرئيسيات غير البشري ، معطل بالحرارة لتدمير البروتينات التكميلية. تحتوي هذه الأمصال ، المعزولة من المحصنة بلقاح قائم على الكبسولة البكتيرية ، على أجسام مضادة للكبسولات.
أضف المعلق البكتيري المقتول كيميائيا إلى المصل. ترتبط الأجسام المضادة على وجه التحديد بالكبسولات البكتيرية ، مما يسهل التظليم البكتيري وتمييزها للتخلص منها بواسطة الخلايا البلعمة. أضف البروتينات التكميلية القياسية لتعزيز التظليل.
نقل البكتيريا الضامة إلى الضامة الملتصقة — الخلايا البلعمة. احتضن لفترة وجيزة.
ترتبط الأجسام المضادة والبروتينات التكميلية على البكتيريا بمستقبلات Fc الضامة والمستقبلات التكميلية ، على التوالي ، مما يعزز الالتصاق البكتيري.
إزالة الوسائط. يغسل بمحلول عازل لإزالة البكتيريا غير الملتصقة.
إصلاح الخلايا للحفاظ على سلامة الخلوية.
استخدم بقعة فلورية لتسمية البلاعم.
باستخدام المجهر الفلوري ، لاحظ البكتيريا الفلورية الملتصقة بالضامة الفلورية المختلفة ، مما يؤكد التظليل البكتيري الفعال بواسطة الأجسام المضادة للكبسولة.
اغسل المخزون البكتيري المعطل ثلاث مرات في PBS لإزالة المثبت. أضف محلول FITC بتركيز نهائي قدره 75 ميكروغرام لكل ملليلت
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية