طريقة توطين التألق المناعي في الجسم الحي لدراسة التوزيع الحيوي للأجسام المضادة
موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 6:15 دقيقة • July 8th, 2025
خذ نموذجا للفئران لسرطان الثدي. تتكون أورام الغدد الثديية من الخلايا السرطانية والخلايا الليفية المرتبطة بالسرطان والخلايا الشحمية والخلايا المناعية والأوعية الدموية الورمية.
حقن الأجسام المضادة الخاصة بالورم المترافق بالفلوروفور عن طريق الوريد.
عند الوصول إلى الأوعية الدموية للورم ، ترتبط الأجسام المضادة ببروتينات الغشاء الخاصة بالورم على بطانة الأوعية الدموية والخلايا السرطانية القريبة.
عزل الغدة الثديية جراحيا وغمرها في وسط تجميد.
احصل على أقسام التبريد على شريحة واشطفها بمخزن مؤقت لإزالة وسط التجميد.
إصلاح الأقسام للحفاظ على بنية الأنسجة. ضع منظفا لتعزيز التلوين المناعي ومحلول مانع لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحددة.
إدخال جسم مضاد أولي خاص بجزيئات الالتصاق على بطانة الأوعية الدموية ، وجسم مضاد ثانوي مترافق بالفلوروفور يرتبط بالجسم المضاد الأساسي ، مع تسمية الأوعية الدموية.
أضف وسيط تثبيت على الشريحة ، وضع غطاء غطاء.
تحت المجهر متحد البؤر ، قم بتقييم التوزيع الحيوي للأجسام المضادة الخاصة بالورم داخل وحول الأوعية الدموية للورم المسمى بالفلورسنت.
بعد التخدير كما هو موضح في بروتوكول النص ، استعد لتلقيح محاليل الأجسام المضادة في الوريد الذيل. تطهير ذيل عن طريق المسح ثلاث مرات بمنديل كحولي. قم بتوسيع عروق الذيل عن طريق التسخين باستخدام وسادة حرارية لمدة 30 ثانية تقريبا ؛ تجنب ت
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية