موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:28 دقيقة • July 8th, 2025
خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على معلق الكريات البيض البشرية. أضف الجراثيم الفطرية المسببة للأمراض المسماة FITC.
أثناء الحضانة ، تنتفخ الجراثيم وتكسر طبقة البروتين الصلبة الكارهة للماء ، مما يعرض السكريات المتعددة لجدار الخلية التي تم التعرف عليها بواسطة مستقبلات التعرف على الأنماط المحددة على الخلايا البلعمة.
يؤديهذا الارتباط إلى مسارات الإشارات داخل الخلايا ، مما يؤدي إلى إعادة ترتيب الأكتين واستيعاب الأبواغ داخل البلعمة.
اعتمادا على حالة تنشيط الخلايا البلعمية ، تظل بعض الجراثيم ملتصقة بالخلايا دون استيعابها.
بعد الحضانة ، حصاد الخلايا ونقلها إلى أنبوب جديد.
الطرد المركزي. أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت وانقلها إلى لوحة قاع V متعددة الآبار.
أدخل الأجسام المضادة ل FITC التي تحمل علامة الفلوروفور والتي ترتبط بجزيئات FITC المكشوفة على الجراثيم الملتصقة ، مما يؤدي إلى تلطيخها.
الطرد المركزي. أعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت وانقلها إلى أنابيب مقياس التدفق الخلوي.
إجراء قياس التدفق الخلوي للتمييز بين الجراثيم الداخلية والملتصقة بالخلايا.
تعرضالخلايا البلعمية التي تحتوي على جراثيم داخلية إشارات FITC ، بينما تظهر الخلايا ذات الجراثيم الملتصقة إشارات FITC والبقع المضادة.
للبدء ، قم بنقل 2 مليون كريات البيض و 4 ملايين كونيديا تحمل علامة FITC في 1.5 مل من RPMI مكملة بنسبة 10٪ FCS إلى صفيحة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية