طريقة قائمة على رقاقة الموائع الدقيقة لتحليل الانجذاب الكيميائي للعدلات السريع باستخدام الدم الكامل

0 مشاهدات3:54 د • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

إلى عينة دم كاملة ، أضف مجمعات أجسام مضادة محددة موجهة ضد خلايا الدم باستثناء العدلات.

أضف الجسيمات المغناطيسية التي ترتبط بخلايا الدم المرتبطة بمركب الجسم المضاد.

انقل العينة ذات العلامات المناعية المغناطيسية إلى منفذ تحميل الخلية لشريحة الموائع الدقيقة.

قم بتوصيل الأقراص المغناطيسية بمنفذ تحميل الخلية.

يجذب المجال المغناطيسي الخلايا ذات العلامات المناعية المغناطيسية ، ويحبسها على الجدران الجانبية للمنفذ.

تتدفق العدلات ، التي لا يتم تمييزها ، إلى الرقاقة وتصبح محاصرة في منطقة إرساء الخلايا.

أضف محلول الجذب الكيميائي المصنف بالفلورسنت ووسط الهجرة إلى الخزانات المحددة. تتدفق السوائل عبر قنوات الموائع الدقيقة ، وتشكل تدرجا للتركيز.

عندما يرتبط الجاذب الكيميائي بمستقبلات العدلات ، فإنه يؤدي إلى تغييرات داخل الخلايا ، مما يتسبب في قيام العدلات بإعادة تنظيم هيكلها الخلوي وتمديد الأرجل الكاذبة.

تعمل هذه الأرجل الكاذبة كأقدام ، مما يدفع العدلات نحو تركيزات أعلى من الجاذبية الكيميائية - وهي عملية تسمى الانجذاب الكيميائي.

استخدام تقنيات الفحص المجهري المناسبة لمراقبة هجرة العدلات استجابة لتدرج الجاذب الكيميائي.

قم بإزالة الماء منزوع الأيونات من الجهاز ، وأضف 100 ميكرولتر من محلول الفبرونيكتين من المخرج. انتظر ثلاث دقائق للتأكد من أن جميع القنوات مملوءة بمحلول الفبرونيكتين. ثم احتضان الجهاز في طبق بتري مغطى لمدة ساعة في درجة حرارة الغرفة.

بعد ذلك ، قم بإزالة محلول Fibronectin من الجهاز ، وأضف 100 ميكرولتر من وسط الهجرة من المخرج. مرة أخرى ، انتظر ثلاث دقائق للتأكد من أن جميع القنوات ممتلئة بوسيط الترحيل. احتضان الجهاز لمدة ساعة أخرى في درجة حرارة الغرفة ، قبل استخدام الجهاز في تجربة الانجذاب الكيميائي. ضع 10 ميكرولترات من الدم الكامل في أنبوب سعة 1.5 ملليلتر. بعد ذلك ، أضف 2 ميكرولتر من كوكتيل الأجسام المضادة في ميكرولترين من الجسيمات المغناطيسية من مجموعة عزل العدلات ، واخلط الأنبوب برفق من أجل تسمية الخلايا الموسومة بالأجسام المضادة مغناطيسيا. احتضن خليط الملصق لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة.

بعد ذلك ، قم بتوصيل قرصين مغناطيسيين صغيرين على جانبي منفذ تحميل الخلية بالجهاز. استنشق الوسيط من جميع منافذ الجهاز. بعد ذلك، قم ببسط ميكرولترين من خليط الدم المسمى ببطء في جهاز الموائع الدقيقة من منفذ تحميل الخلية. ضع جهاز الموائع الدقيقة على مرحلة المجهر الذي يتم التحكم في درجة حرارته عند 37 درجة مئوية. انتظر بضع دقائق حتى يتم احتجاز عدد كاف من العدلات في منطقة لرسو الزنزانة.

بعد ذلك ، أضف 100 ميكرولتر من محلول الجاذب الكيميائي في وسط ترحيل 100 ميكرولتر إلى خزانات المدخل المخصصة لها ، باستخدام ماصتين. سيؤدي ذلك إلى توليد تدرج جاذب كيميائي عن طريق الخلط الكيميائي المستمر القائم على التدفق الصفحي. يمكن أن يكون الجاذب الكيميائي عبارة عن بروتينات مؤتلفة ، مثل FMLP ، أو عينات سريرية ، مثل الطافية للبلغم من مرضى الانسداد الرئوي المزمن.

بمجرد استقرار التدفق ، احصل على صور مضان لتدرج ديكستران FITC في القناة. بعد ذلك ، قم باحتضان الجهاز على مرحلة المجهر الذي يتم التحكم في درجة حرارته ، أو في حاضنة زراعة الخلايا التقليدية لمدة 15 دقيقة. بعد الحضانة ، قم بتصوير قناة التدرج ، باستخدام هدف 10 مرات لتسجيل المواضع النهائية للخلية لتحليل البيانات.

08:24

يقترن تصوير البروتين G مستقبلات بوساطة الكيميائي والأحداث يشير في خلايا HL60 العدلات مثل

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:53

المجهر الجر المتكاملة مع ميكروفلويديكس للهجرة الجماعية الكيميائية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:21

الجسيمات الحيوية Microarrays للتحليل الكيميائي والجزيئي للالعدلة البشرية يحتشدون في المختبر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:28

جهاز ميكروفلويديك الانجذاب الكيميائي لقياس تركيز البكتيريا في التدرجات مستقرة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

15:01

تتبع الزحف داخل اللمعة العدلات ، والهجرة والانجذاب الكيميائي Transendothelial في الأنسجة بواسطة الميكروسكوب فيديو Intravital

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

15:41

رقاقة ميكروفلويديك للتحليل الكيميائي للخلايا متعددة الاستخدامات واحدة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:13

منصة ميكروفلويديك الانجذاب الكيميائي لقياس العدلات من الدم غير المجهزة الجامعة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:26

التصوير في الوقت الحقيقي من غشائي المفارق خلايا العدلات خلية أثناء التهجير تحت الفسيولوجية تدفق

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:21

طريقة الكل على رقاقة للتحليل الكيميائي العدلات السريعة مباشرة من قطرة الدم

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:38

التحديد الكمي الوحيدات البشرية إنزيمية في المختبر واللمفاويات مورين الاتجار في فيفو

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026