موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 4:46 دقيقة • July 8th, 2025
أضف عينات المسيل للدموع البشرية وكوكتيل حبة الأجسام المضادة إلى لوحة فحص مغسولة.
ترتبط الأجسام المضادة بخرز مغناطيسي مرمز بالألوان ، مشربة بنسب متفاوتة من الفلوروفورات المقابلة للتوقيعات الطيفية المميزة ، مما يسهل اكتشاف السيتوكين المتعدد.
ترتبط السيتوكينات المسيلة للدموع بالأجسام المضادة الملتقطة المرتبطة بالخرزة.
باستخدام غسالة اللوحة المغناطيسية ، قم بتسوية مجمعات حبة الأجسام المضادة. باستخدام المخزن المؤقت ، قم بإزالة الجزيئات الحيوية غير المرتبطة.
أضف الأجسام المضادة للكشف عن البيوتينيل التي ترتبط بالسيتوكينات المقلدة.
ماصة ستربتافيدين-فيكوريثرن مترافقة, الذي يرتبط بالأجسام المضادة البيوتينيل.
باستخدام غسالة اللوحة ، قم بإزالة محتويات البئر غير المقيدة. أعد تعليق المجمعات المرتبطة بالسيتوكين في سائل الغمد.
أثناء تحليل العينة ، ينقل النظام السائل مجمعات الخرز إلى مجموعة البصريات.
ينشط الليزر الأول أصباغ الخرز الداخلية ، مع تحديد الإشارة الناتجة للسيتوكينات المحددة.
ينشط الليزر الثاني جزيء المراسل المرتبط بمركب الخرزة ، الذي تمثل شدة إشارته تركيز السيتوكين ، مما يتيح القياس الكمي المتزامن للسيتوكينات المتعددة.
لإجراء مقايسة تعدد الإرسال القائم على الخرزة ، قم بإحضار جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة ، وقم بدوامها لمدة خمس إلى 10 ثوان. إذا تم تخزين عينات المسيل للدموع عند 80 درج
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية