موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:58 دقيقة • July 8th, 2025
الحصول على أقراص أوراق نبات الأرابيدوبسيس ثاليانا. اغمرها في آبار صفيحة دقيقة تحتوي على ماء مقطر مزدوج لمنع الجفاف.
احتضان الأقراص للسماح بالتعافي من الجرح.
بعد الحضانة ، قم بإزالة الماء. أضف خليط تفاعل يحتوي على الببتيدات المشتقة من البكتيريا وإنزيم بيروكسيداز الفجل واللومينول.
باستخدام قارئ صفيحة دقيقة ، قم بقياس اللمعان بمرور الوقت.
تربط مستقبلات التعرف على الأنماط ، أو PRRs ، على الخلايا النباتية ، الببتيدات البكتيرية ، وهي أنماط جزيئية مرتبطة بالميكروب.
علاوة على ذلك ، يرتبط PRR بمستقبله المشترك ، ويخضع للفسفرة المتبادلة ، وينشط كينازات البروتين الشبيهة بالمستقبلات ، ويتسبب في تدفق الكالسيوم داخل الخلايا.
وهذا بدوره ينشط متماثل أوكسيديز الانفجار التنفسي عبر الغشاء ، أو بروتينات RBOH.
يحفز RBOH المنشط إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية خارج الخلية ، أو ROS ، مما يتسبب في انفجار مؤكسد. علاوة على ذلك ، يتم تحويل ROS إلى بيروكسيد الهيدروجين.
يستخدمبيروكسيداز الفجل بيروكسيداز الهيدروجين لأكسدة اللومين في حالة إثارة ، مما ينبعث منه لمعان عند العودة إلى الحالة الأرضية.
قم بقياس اللمعان لمراقبة الانفجار التأكسدي السريع بعد التعرف على النمط الميكروبي.
بعد 4 إلى 5 أسابيع من الإنبات ، استخدم ثقب خزعة حاد بطول 4 ملم لإزالة قرص ورقة واحد لكل نبات نبات الأرابيدوبسيس ، وتجنب منتصف الوريد والحرص
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية