قياس الجاذبية في مجموعة مختلطة من الخلايا التائية

ابدأ بلوحة متعددة الآبار تحتوي على خلايا شجيرية للفأر ، أو DCs تحمل مستضدات خيفية أو متغيرات وراثية من المستضدات الذاتية.

إدخال الخلايا التائية للفأر ، بما في ذلك الخلايا التائية الحساسة غير المتفاعلة مع المستضدات الذاتية ، مع التعرف على المستضدات الغريبة.

تتعرف الخلايا التائية الحساسة على هذه المستضدات الخيفية وتتفاعل مع DCs ، مما يؤدي إلى إعادة ترتيب الهيكل الخلوي ، بما في ذلك إعادة تنظيم F-actin.

هذا يعزز المستقبلات الموجودة على الخلايا التائية للتفاعل مع جزيئات التحفيز المشترك على التيار المستمر ، مما يشكل اتصالا خلويا - مشبك مناعي.

قم بإصلاح الخلايا ، ونقلها إلى أنبوب ، وأدخل مزيجا من الأجسام المضادة المسماة بالفلوروكروم الخاصة بمستقبلات الخلايا التائية والتيار المستمر ، مما يضفي مضان مميز.

قم بإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة وإعادة تعليق الخلايا في مخزن مؤقت يحتوي على عامل نفاذية يتخلل الخلايا وعلامات البروتين الخضراء الموسومة بالفلوروفور التي ترتبط ب F-actin.

جهاز الطرد المركزي وإعادة تعليق الخلايا في مخزن مؤقت يحتوي على صبغة نووية ، مما يؤدي إلى تلطيخ النوى باللون الأحمر.

باستخدام قياس التدفق الخلوي للتصوير ، حدد المزدوجات - المقابلة للخلية التائية واقترانات التيار المستمر مع الشعيرات المتصالبة الخضراء ل F-actin - مما يؤكد تكوين المشبك.

حدد الزوجيات التي تمثل درجة الجاذب