موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 5:14 دقيقة • July 8th, 2025
خذ صفيحة متعددة الآبار تحتوي على نموذج عدوى المتفطرة السلية أو Mtb.
تحتوي الآبار على مجاميع خلوية تتكون من نواة من الضامة النخرية المصابة ب Mtb و Mtb ، وتحيط بها البلاعم غير المصابة - تحاكي عدوى في الجسم الحي.
خذ مخففا تسلسليا للمضادات الحيوية ريفامبيسين وموكسي فلوكساسين.
تخلص من الوسائط من صفيحة العدوى ، وانقل تخفيفات المضادات الحيوية إلى الآبار ، واحتضنها.
تنتشر المضادات الحيوية من خلال مجاميع الخلايا وتدخل الخلايا البكتيرية.
يربط ريفامبيسين بوليميراز الحمض النووي الريبي البكتيري ، مما يثبط تخليق الحمض النووي الريبي ويسبب الموت البكتيري.
يربط موكسيفلوكساسين توبويزوميراز الحمض النووي البكتيري ، مما يمنع التكاثر ويعيق نمو البكتيريا. يحفز الربط أيضا استجابات الإجهاد ، بما في ذلك تراكم أنواع الأكسجين التفاعلية ، مما يؤدي إلى قتل البكتيريا.
بعد الحضانة ، أضف ريزازورين - مؤشر الأكسدة والاختزال. داخل البكتيريا الحية والنشطة الأيضية ، يقلل إنزيم أوكسيدوريدوكتاز من الريزازورين الأزرق إلى ريسوروفين الفلورسنت الوردي.
قم بقياس التألق للكشف عن البكتيريا القابلة للحياة.
ينخفض بقاء البكتيريا مع زيادة تركيز المضادات الحيوية ، مما يدل على فعاليتها ضد Mtb.
لاختبار المخدرات، قم بإعداد دواءين مضادين للسل بثلاث نسخ على صفيحة جديدة مكونة من 96 بئرا على النحو التالي. أولا ، أضف 125 ميكرولترا من 7H9-C ا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية