موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 3:29 دقيقة • July 8th, 2025
خذ صفيحتين دقيقيتين يحتويان على أغطية مع ضامة مشتقة من نخاع العظام أو BMMs.
أضف البروماستيجوت الحلقي ليشمانيا - المرحلة السوطية الممدودة - في صفيحة واحدة وأماستيجوتس - المرحلة البيضاوية غير السوطية - في طبق آخر.
أثناء الحضانة ، ترتبط الطفيليات بمستقبلات البلاعم ، مما يؤدي إلى البلعمة بوساطة المستقبلات.
يندمج البلعمة مع الجسيمات الحالة والحويصلات المشتقة من الشبكة الإندوبلازمية وجهاز جولجي ، وينضج في فجوة طفيلية.
يؤديانخفاض درجة الحموضة في الفجوة إلى تمايز البروماستيجوت إلى amastigote وتكراره.
يغسل لإزالة الطفيليات غير الداخلية.
قم بإصلاح البلاعم المصابة وإضافة المنظفات لنفاذية الخلايا والطفيليات.
أدخل صبغة الحمض النووي الفلورية لتلطيخ نواة البلاعم والطفيليات.
قم بتركيب الطبقات على الشرائح وراقب تحت المجهر الفلوري ، وحدد النوى المضيفة الأكبر ونواة amastigote الأصغر المحيطة.
قارن بين أرقام amastigotes لتقييم تكاثرها داخل البلاعم المصابة في البداية ببروماستيجوت غير متمايزة مقابل تلك المصابة ب amastigotes التكاثري.
لإصابة الخلايا ب L. Amazonensis ، قم بتخفيف معلق الطفيلي إلى التعدد التجريبي المناسب للعدوى ، وأضف 50 إلى 100 ميكرولتر من الطفيليات إلى كل بئر من جميع الألواح المكونة من 6 آبار ، بما في ذلك جميع النقاط الزمنية للتجربة. احتضان الضامة المشتقة من نخاع العظام لفترة العدوى ودرجة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية