موسوعة JoVE للتجارب
علم المناعة
0 مشاهدة • 2:17 دقيقة • July 8th, 2025
خذ حشوة غشاء تحتوي على طبقة ظهارية أحادية الأشعة السينية.
ضع الغشاء في بئر يحتوي على خلايا الدم المحيطية أحادية النواة ، أو PBMCs - الخلايا المناعية التي تفرز السيتوكينات وجزيئات الإشارات الأخرى.
ضع المقاومة الكهربائية عبر الظهارة ، أو أقطاب TEER ، في إدخال الغشاء.
قم بتطبيق تيار كهربائي صغير وقياس المقاومة لتقييم نفاذية أحادية الطبقة التي تنظمها الوصلات الضيقة.
الوصلات الضيقة هي بروتينات عبر الغشاء مرتبطة بالهيكل الخلوي من خلال بروتينات السقالة.
تشكلهذه البروتينات الوصلية معا حاجزا قويا بين أغشية الخلايا ، مما يحد من مرور الجزيئات الكبيرة ومسببات الأمراض.
تعيق البروتينات الوصلية السليمة تدفق التيار الكهربائي ، مما يؤدي إلى ارتفاع TEER ، مما يشير إلى نفاذية أحادية الطبقة الطبيعية.
يقللالتعرض للأشعة السينية من مستويات البروتين الوصلي ، مما يزيد من نفاذية أحادية الطبقة ويقلل من TEER.
علاوة على ذلك ، تعمل جزيئات الإشارات من الخلايا المشعة على تنشيط PBMCs المزروعة المشتركة التي تطلق السيتوكينات ، مما يؤدي إلى مزيد من الانخفاض في مستويات البروتين الوصلي وتعطيل سلامة الحاجز.
وبالتالي ، تزداد نفاذية أحادية الطبقة ، مما يؤدي إلى مزيد من الانخفاض في TEER.
لتقييم المقاومة الكهربائية عبر الظهارة ، أو TEER ، لخلايا Caco-2 مباشرة بعد التشعيع ، قم بنقل نصف إدخالات ثقافة خلايا Caco-2 إلى صفيحة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية